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nrDNA ITS区文献资料
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西藏麻花艽种质资源的遗传多样性分析
目的 对西藏不同产地17份麻花艽Gentiana straminea样品的遗传多样性进行比较分析.方法 居群采样,以相同产地同属近缘种粗茎秦艽G.crassicaulis为外类群比对,nrDNA ITS区序列分析,构建UPGMA系统树.结果 西藏产麻花艽nrDNA ITS区序列有1个多态性位点;外类群粗茎秦艽6份样品序列完全一致.结论 麻花艽与外类群种间区别明显;17份不同产地麻花艽被划分为2类,遗传多样性较为丰富,为西藏麻花艽药材品质评价及麻花艽核心种质的构建提供基础资料.
关键词： 麻花艽 种质资源 nrDNA ITS区 遗传多样性 藏药 -
金银花nrDNA ITS区聚合酶链反应条件的研究
目的:金银花nrDNA ITS区序列G+C含量为68%,用常规的PCR方法扩增效果差.本研究通过改变扩增程序及使用改性剂的方法显著提高了金银花nrDNA ITS区的扩增效率.方法:分别从金银花叶及药材中提取总DNA,通过优化扩增条件,对nrDNA ITS区进行扩增,并比较了两种优化方法的差别及适应性.方法1:提高变性温度至97℃;方法2:添加混合改性剂(DMSO 4%-甘油10%).结果:与方法1相比,方法2可降低变性温度5 ℃,升高退火温度9 ℃,降低镁离子浓度至0.5 mmol/L,降低Taq DNA聚合酶用量至0.1 U(30 μl体系),PCR产物量显著提高,且可消除植物DNA粗提物中杂质的干扰.结论:通过提高退火温度及添加改性剂可克服高G+C含量金银花nrDNA ITS区序列扩增的困难,该方法的建立有助于解决植物来源DNA模板的PCR扩增问题.
关键词： 金银花 nrDNA ITS区 高G+C含量 PCR扩增 反应条件优化
