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实时荧光定量PCR技术及其在几类病原体检测中的应用
实时荧光定量PCR是传统PCR技术与光谱技术相结合而发展起来的核酸定量技术,它具有特异性强、重复性好和PCR污染少等优点.作者对实时荧光定量PCR技术的原理、影响因素以及在临床病原体的快速检测和诊断应用方面进行了综述.
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实时荧光定量聚合酶链反应技术及应用
从1985年Kary Mullis发明了聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,到1988年Saiki发现耐热DNA聚合酶,使PCR进入应用阶段,至今已有近20年的历史了.实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)在核酸定量方面具有高敏感性、特异性强、可重复性等优点,从应用以来,给分子诊断领域带来了一次革命,并被广泛应用,成为科研的主要工具之一.本研究旨在阐述RQ-PCR的基本原理,介绍5种荧光化学方法:水解探针(hydrolysisprobes)、分子信标(molecularbeacons)、荧光标记引物(fluorescently-labeled primer)、双杂交探针(dual hybridization probes)、双链DNA嵌合剂SYBR Green Ⅰ(the double-stranded DNA-intercalating agent SYBR Green Ⅰ),并阐述其研究进展及应用.
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定量PCR技术及其应用现状
实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测来给核酸定量的技术.目前,该技术已经应用于临床微生物、基因表达、肿瘤免疫、微小残留病变的检测,DNA拷贝数的测量、基因组变异和多态性等许多方面.现主要介绍该技术的一些基本原理及其应用.