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血清酸性磷酸酶测定法的实验研究
目的建立以2,6-二氯-4-乙酰基磷酸盐(DCAP-P)为底物的一种新的酸性磷酸酶(ACP)的测定方法.方法在ISP半自动生化分析仪上研究测定法的试剂配方与实验参数.结果本法测定DCAP-P吸收峰为:326 nm;Km=0.139 mmol/L;340 nm时DCAP-P的摩尔消光系数为14 440 L/(mo1. cm);缓冲液浓度0.1 mol/L,适条件:pH 5.4,底物浓度2.0 mmol/L,延滞期30 s,线性反应期15 min;线性范围为0～1 188 u/L;高、低值回收率均在95%～105%;高、中、低值批内CV分别为:2.6%、1.9%、1.2%,批间CV值分别为:2.8%、2.1%、1.2%;血红蛋白(Hb)＜115.62mg/L对测定结果无影响;黄疸对测定结果无影响;与长征试剂盒相比r=0.978;试剂在-20℃可稳定一个月;本方法的参考值范围为9 u/L～26 u/L.结论此方法重复性好,线性反应期长,线性范围广,干扰因素少适用于自动生化分析.
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以DCAP-P为底物的酸性磷酸酶连续监测法的建立
目的:建立以2,6-二氯-4-乙酰基苯基磷酸盐(DCAP-P)为底物的一种新的酸性磷酸酶(ACP)的测定方法.方法:在BTS-310半自动生化分析仪上研究连续监测法,建立实验参数.结果:本法测定DCAP吸收峰为326nm;ACP的Km=0.139mmol/L;340nm时DCAP的摩尔消光系数为14440L/(mol×cm);缓冲液浓度0.1mol/L,适pH5.4,底物浓度2.0mmol/L,延滞期60s,线性反应期15min;线性范围为0～1188u/L;血红蛋白(Hb)＜115.62mg/L对测定结果无影响;黄疸对测定结果无影响;本法总ACP与PAP(前列腺酸磷酶)的参考值范围分别为12.58～19.42u/L、2.52～9.04 u/L.结论:此方法重复性好,线性反应期长,线性范围广,干扰因素少,适用于自动生化分析.
