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间隙连接蛋白Connexin43对力刺激下人牙周膜细胞成骨相关转录因子表达的影响
目的 研究间隙连接蛋白Connexin43 (Cx43)在牵张力刺激下对牙周膜成纤维细胞成骨相关转录因子表达的影响.方法 对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)施加变形量为5％的牵张力,在受力1、2、4、8、24 h后检测成骨相关转录因子Osterix、RUNX2及Cx43 mRNA的表达.分别采用间隙连接的阻断剂18α-GA和基因沉没Cx43的方法阻断Cx43后观察Osteix、RUNX2 mRNA表达的变化.结果 对hPDLFs施加牵张力时,hPDLFs内的Cx43、Osterix和RUNX2mRNA水平随加力时间增加表达均明显增强(p均＜O.05),在24h达到高值.分别阻断间隙连接通道和抑制间隙连接蛋白Cx43,结果显示Osterix和RUNX2 mRNA表达水平均受到明显抑制(P均＜O.05).结论 力刺激下间隙连接蛋白Cx43及成骨转录因子Osterix和RUNX2在hPDLFs中的表达呈现时间依赖性增加.间隙连接蛋白Cx43可能参与了这两种成骨转录因子表达的调节.
关键词： 牙周膜细胞 机械力 connexin 43 成骨转录因子 -
MSCs成骨分化中BMP2对成骨转录因子SATB2表达的调控作用
目的 探索间充质干细胞(MSCs)成骨分化中骨形态发生蛋白2(BMP2)对成骨转录因子SATB2表达的调控作用.方法 体外培养小鼠间充质细胞系C2C12,腺病毒介导的BMP2 (Adv-BMP2)诱导其向成骨细胞分化,建立并验证C2C12细胞成骨分化细胞模型.Real-Time PCR和Western blotting分别检测C2C12细胞成骨分化过程中经不同浓度Adv-BMP2处理不同时间时SATB2 mRNA和SATB2蛋白表达；以经相应浓度Adv-β-Gal处理细胞作对照.结果 经150 pfu/cell Adv-BMP2处理C2C12细胞5d后,成骨细胞标志基因Ⅰ型胶原,骨唾液酸蛋白和骨钙素表达以及碱性磷酸酶活性均显著增加,MSCs成骨分化模型构建成功.150 pfu/cell Adv-BMP2诱导C2C12细胞成骨分化过程中,SATB2 mRNA和SATB蛋白表达随分化进程而增加；Adv-BMP2浓度为0～225 pfu/cell时,SATB2表达随Adv-BMP2浓度升高而增加.结论BMP2可调控SATB2的表达,从而影响MSCs成骨分化.
