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卡拉胶/纳米羟基磷灰石/胶原可注射骨修复材料的制备与表征
目的 制备一种新的可注射骨修复材料卡拉胶/纳米羟基磷灰石/胶原(nHAC/Carr),并进行表征.方法 将纳米羟基磷灰石/胶原(nHAC)微粒分散在卡拉胶中.结果 nHAC/Carr与nHAC的X射线衍射谱无明显差别,可注射材料保持了nHAC的特性.nHAC/Carr的红外光谱显示卡拉胶的化学结构未发生变化.流变性能测试显示nHAC/Carr具有与卡拉胶相似的水凝胶特性.扫描电镜照片和孔隙率分析表明nHAC/Carr材料具有多孔结构,孔隙率在90%左右.结论 可注射材料nHAC/Carr有望被用作骨修复材料.
关键词： 骨修复 卡拉胶 纳米羟基磷灰石/胶原 可注射 -
曲古抑菌素A对大鼠脂肪干细胞在二维及三维培养下早期骨向分化的影响
目的:研究曲古抑菌素A (trichostatin A,TSA)对大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在二维培养板(TCP)和三维复合纳米羟基磷灰石/胶原(nano-hydroxyapatite/collagen,nHAC)支架上早期骨向分化的影响.方法:处理组分别在含75 nmol/L TSA的二维培养板和三维nHAC上培养ADSCs(TCPT组和nHACT组),未添加TSA的两组(TCP组和nHAC组)为对照组.使用扫描电子显微镜(field emission scanning electron microscope,FESEM)对接种ADSCs 1、3d后nHAC和nHACT组细胞的生长情况进行表征,以碱性磷酸酶(ALP)活性为早期骨向分化指标,分别检测3、5、7d时的ALP活性,用Western blot检测成骨指标Runx2、骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白2(BMP2)的表达.结果:ADSCs在三维培养中均表现出良好的粘附、铺展,其中经TSA诱导的细胞对支架的黏附、铺展更好;ALP值在3、5、7d持续增高,其中以nHACT组高,组间差异显著(P＜0.05);Western blot结果显示Runx2、OPN、BMP2在nHACT组表达高,与ALP结果一致.结论:TSA对ADSCs早期骨向分化有促进作用,复合三维支架共培养后促进作用显著.
关键词： 曲古抑菌素A 纳米羟基磷灰石/胶原 脂肪干细胞 分化 -
组织工程骨修复兔下颌骨缺损的实验研究
目的:探讨以兔骨髓基质细胞(BMSCs)为种子细胞、纳米羟基磷灰石/胶原(nHAC)为支架材料、兔自体富血小板血浆(PRP)为生长因子,构建组织工程骨修复兔下颌骨缺损能力.方法:兔下颌骨体部15 mm×15 mm全层骨缺损分别采取:A组,组织工程骨；B组,自体髂骨；C组,单纯nHAC材料；D组,对照组修复.术后1、3、6个月行放射性核素骨检测、骨密度测定及组织学观察.结果:放射性核素骨检测:术后1、3个月,A、B组成骨代谢能力明显优于C、D组,术后6个月时,各组之间骨代谢能力无明显差异；骨密度测定:A、B、C组骨缺损区域骨密度逐渐增加明显高于D组,术后3个月A组、B组骨密度较C组明显提高；组织学检查:A组术后1个月可见小片状类骨质出现,nHAC开始降解,术后3个月时新生骨成大片状结构,术后6个月nHAC几乎全部降解,缺损由骨组织修复,其成骨量与B组无明显差异却明显大于C组,D组仅为纤维组织修复.结论:本实验构建的组织工程骨修复颌骨缺损能力与自体髂骨相似而强于单独使用nHAC,且nHAC材料于体内可完全降解,因此BMSCs与nHAC及自体PRP复合所构建的组织工程骨是一种良好的骨缺损替代材料.
关键词： 组织工程骨 骨髓基质细胞 纳米羟基磷灰石/胶原 富血小板血浆 骨缺损 -
富血小板血浆和纳米羟基磷灰石胶原支架对人脂肪干细胞成骨分化的影响
目的:观察人脂肪干细胞在向成骨细胞分化过程中富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的作用,及其与支架材料纳米羟基磷灰石/胶原生物相容性的实验研究.方法: 酶消化法获得脂肪干细胞,分别培养在含100 ml/L FBS的DMEM培养液、成骨细胞诱导液和添加PRP的成骨细胞诱导液中,观察PRP对人脂肪干细胞向成骨细胞分化的影响.并将人脂肪干细胞与经PRP孵育的纳米羟基磷灰石/胶原复合培养7 d后,环境扫描电镜观察细胞在支架材料上附着增殖情况.结果:酶消化法能成功获得人脂肪干细胞,在PRP的作用下,脂肪干细胞能够更加有效的向成骨细胞分化,形成更多的钙化结节,结节细小致密.环境扫描电镜观察,脂肪干细胞能在支架上充分的附着伸展.结论:人脂肪干细胞的成功分离诱导分化,为牙周组织工程提供了新的种子细胞来源,PRP是促进该细胞成骨细胞分化的有效的细胞因子组合,纳米羟基磷灰石/胶原可以作为牙周组织工程的支架材料.
关键词： 富血小板血浆 脂肪干细胞 牙周组织工程 纳米羟基磷灰石/胶原 -
应用放射性核素骨显像观察组织工程化骨修复兔下颌骨缺损的能力
目的:应用99mTc-MDP放射性骨显像观察复合兔骨髓基质细胞的纳米羟基磷灰石/胶原(BMSCs+nHAC)修复兔下颌骨缺损的能力.方法:兔下颌骨体部范围为15 mm×15 mm的全层骨缺损分别采取相应方法修复:A组,BMSCs+nHAC 修复;B组,nHAC修复;C组,空白对照组,缺损不做修复.术后4、8、12周分别通过放射性核素骨显像进行监测.结果:术后4周,A组核素浓聚程度明显高于B组、C组,差异具有统计学意义,B组核素浓聚程度亦高于C组,差异具有统计学意义;术后8周,A组核素浓聚程度明显高于B组、C组,差异具有统计学意义,B组核素浓聚程度与C组无显著差异;术后12周,3组核素浓聚程度无显著性差异.结论:BMSCs+nHAC修复下颌骨缺损与单独使用nHAC相比具有较好的成骨能力和血管化程度.
关键词： 纳米羟基磷灰石/胶原 骨髓基质细胞 骨缺损 放射性核素骨显像 -
纳米羟基磷灰石/胶原对富血小板血浆促进骨髓基质干细胞成骨向分化的影响
目的:探讨纳米羟基磷灰石/胶原(nHAC)作为支架材料对兔自体富血小板血浆(PRP)体外诱导兔骨髓基质干细胞(rBMSCs)向成骨细胞分化能力的影响.方法:兔自体PRP分别作用于与nHAC联合培养的rBMSCs及常规培养的rBMSCs,利用扫描电镜观察rBMSCs在nHAC上的生长情况;通过碱性磷酸酶(ALP)活性测定,骨钙素(OCN)含量测定,骨桥蛋白(opn)mRNA相对表达量的分析,比较两种培养条件下兔自体PRP诱导rBMSCs向成骨细胞分化能力上的差异.结果:联合培养的rBMSCs在nHAC上生长良好,其ALP活性、OCN含量均较常规培养明显增加,且opn mRNA相对表达量是常规培养组的4.78倍.结论:nHAC作为支架材料可明显提高兔自体PRP诱导rBMSCs向成骨细胞分化的能力.
关键词： 纳米羟基磷灰石/胶原 富血小板血浆 骨髓基质干细胞
