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他莫昔芬对大鼠脊髓损伤后炎性反应及细胞凋亡的影响
目的 检测他莫昔芬对脊髓损伤大鼠核因子kappa B抑制蛋白激酶复合体/核因子kappa B (IKK/NF-κB)通路及细胞凋亡的影响,研究其神经保护机制.方法 将51只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组(每组17只):假手术组(仅行椎板切除术)、对照组(脊髓损伤后硬膜下注射2％二甲基亚砜5 mL/kg)和他莫昔芬组[脊髓损伤后硬膜下注射他莫昔芬5 mg/kg(溶于2％二甲基亚砜1 mg/mL)].改良Allen法(25 g·cm)制作T12节段脊髓损伤模型.术后24 h采用免疫印迹法(Western blot)检测损伤节段脊髓核因子kappa B p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子κB抑制因子α(pI-κB α)和活性半胱天冬酶-3 (caspase-3)表达水平,应用Gel Pro Analyser 4.0定量灰度值(OD);比色法检测脊髓组织中髓过氧化物酶(MPO)活性.统计方法采用单因素方差分析和Bonferrni检验.结果 与假手术组相比,对照组和他莫昔芬组术后24h炎症相关指标NF-κB p65[(0.31±0.03)比(3.17±0.12)比(1.55±0.07),P＜0.05]、pI-κB α[(0.12±0.01)比(0.98±0.05)比(0.53±0.03),P＜0.05]的表达水平及MPO活性较高[(0.06±0.01)U/mg比(0.64±0.03) U/mg比(0.35±0.02)U/mg,P＜0.05],但他莫昔芬组低于对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.05);此外,凋亡相关的活性caspase-3在假手术组表达水平极低,另外两组则明显升高,其中对照组升高更为显著[(0.08±0.01)比(1.03±0.05)比(0.36±0.02),P＜0.05].结论 他莫昔芬能够调控脊髓损伤部位的细胞凋亡,并减轻炎性反应,从而发挥神经保护作用.
