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SPAG9在结直肠腺瘤及结直肠癌中的表达及意义
目的：探讨精子相关抗原9(Sperm-associated antigen 9，SPAG 9)在结直肠腺瘤及结直肠癌中的表达及意义。方法选取经临床病理诊断的结直肠癌标本及相应的癌旁组织69例，结直肠腺癌18例，结直肠正常组织20例，应用免疫组化法检测SPAG9在结直肠腺瘤及结直肠癌中的表达及分布情况，并结合结直肠癌的分级及临床指标进行分类比较。结果 SPAG9在结直肠腺瘤及结直肠癌标本中高表达，在正常结直肠及癌旁组织中不表达。SPAG9的表达与结直肠癌患者年龄、性别、血清CEA水平、淋巴结转移、组织分级均无明显的相关关系，而与临床分期有统计学意义；在早期结直肠癌为I+I (92.7%)、进展期结直肠癌为I I+IV (64.3%)（P＜0.05）。结论 SPAG9在结直肠腺瘤及结直肠癌标本中高表达，SPAG9表达与临床期别有关，SPAG9在肿瘤的临床早期阶段（I和I期）表达的密切关系，表明SPAG9可能在肿瘤早期扮演一个重要的作用。SPAG9作为一种新型的生物标志物，可用于癌症的早期检测和诊断。
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精子相关抗原9(SPAG9)在乳腺癌中的表达及其临床意义
目的 研究乳腺癌患者组织中精子相关抗原9(sperm associated antigen 9,SPAG9)和血清中SPAG9抗体的表达水平,了解其对乳腺癌诊断的价值.方法 免疫组化(immunohistochemistry,IHC)法检测40例乳腺癌患者病灶及其癌旁组织中SPAG9表达水平,分析SPAG9表达水平与临床病理分期(tumor node metastasis stage,TNM)的关系.酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测53例初诊乳腺癌、48例良性病变和43例健康对照血清SPAG9抗体浓度,分析血清SPAG9抗体浓度与患者临床指标的关系;并绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评价血清SPAG9抗体对乳腺癌诊断的价值及意义.结果 乳腺癌病灶组织中SPAG9蛋白表达高于癌旁组织,二者差异有统计学意义(P =0.000).乳腺癌血清SPAG9抗体浓度[10.22(5.055～16.660) mU/ml]显著高于良性病变组[6.666(3.369～11.517) mU/ml] (P ＜0.05)和健康对照组[5.079(2.857-8.571) mU/ml](P=0.000),且与年龄和TNM分期明显有关.ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.715,得出SPAG9抗体佳临界值为10.185mU/ml时,SPAG9抗体诊断乳腺癌的敏感度为50.9％,特异性为88.4％.结论 SPAG9及其抗体在乳腺癌病灶组织和血清中高表达,血清SPAG9抗体对乳腺癌诊断具有一定的价值.
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肿瘤患者自身抗体抗SPAG9在外周血中的表达研究
目的：通过对肿瘤患者血清中抗原9（SPAG9）的自身抗体的检测，了解患者外周血中抗SPAG9自身抗体的表达情况。方法：利用SPAG9重组，确立ELISA检测肿瘤患者血清中抗SPAG9抗体的有效性，从而了解由SPAG9所诱发的患者体液免疫反应。采用的判断标准为：参照组血清中抗SPAG9抗体0D的均值加2倍SD作为阳性。结果：研究的90例肿瘤患者中，血清SPAG9免疫反应总体阳性率为32.3%，肝癌组阳性率为33.3%，肺癌组阳性率为17.9%，其他肿瘤组阳性率为50%，健康对照组为33.3%。结论：SPAG9自身抗体在不同的肿瘤患者外周血中有着不同程度的表达，此次研究具有一定的医学价值。
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精子相关抗原SPAG9在人精液精子中的表达及定位
目的:SPAG9作为MAPK家族中的成员,在精卵融合过程中发挥着重要的作用.本研究检测SPAG9在人精液精子中的表达情况. 方法:取人不同组织(肌肉、肝、食管、肺、胃、肾、前列腺、子宫、睾丸、附睾)标本及健康男性的精液精子,为了排除圆形细胞的污染,精液标本经非连续性Percoll梯度离心、分离纯化;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和间接免疫荧光方法,从mRNA和蛋白水平检测SPAG9在精子中的表达. 结果:RT-PCR结果显示,SPAG9 mRNA不仅在各种不同的组织中有表达,而且在人精液精子中也有表达;间接免疫荧光结果显示,SPAG9蛋白主要定位于人精液精子头部的赤道板和精子尾部鞭毛上. 结论:SPAG9在人精液精子中有表达,可能在精子获能和运动中有一定作用.
关键词： 精子 逆转录.聚合酶链式反应 间接免疫荧光 SPAG9 -
SPAG9mRNA在DAC干预A549细胞前后的表达
目的 检测DAC干预前后A549细胞中SPAG9的表达，探讨SPAG9表达的生物学机制。方法 实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测肺组织标本和DAC干预A549细胞前后SPAG9mRNA的转录情况。结果 DAC干预A549细胞前后SPAG9的表达差异性显著，随甲基化状态的延长而减弱。结论 低甲基化状态抑制SPAG9表达。SPAG9在肺癌的早期高度表达，中晚期表达减弱，可作为肺癌早期诊断和治疗的生物学参考指标之一。
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过表达精子相关抗原9对前列腺癌细胞PC3生物学行为的影响
目的 研究精子相关抗原9(sperm-associated antigen 9,SPAG9)对前列腺癌细胞增殖、细胞周期、侵袭转移等生物学行为的影响,探讨可能的分子机制.方法 前列腺细胞PC3中转染SPAG9后,qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞SPAG9的表达变化;CCK-8检测SPAG9对PC3细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPAG9对PC3细胞周期的作用;Transwell实验检测转染SPAG9对PC3细胞体外迁移能力的影响.结果 qRT-PCR检测结果表明SPAG9组的SPAG9的相对表达量(20.776 3±3.080 9)明显高于对照组(1.010 2±0.178 4)(P ＜0.01).Western blot结果显示在前列腺癌细胞PC3中过表达SPAG9后成功.CCK-8实验表明SPAG9促进细胞增殖;流式细胞术检测结果表明过表达SPAG9使PC3细胞周期加快;在Transwell迁移实验中,SPAG9转染细胞后,SPAG9组穿膜细胞数为(88.078 ±4.509)/视野,对照组穿膜细胞数为(54.333 ±4.582)/视野,SPAG9组细胞迁移能力明显高于对照组(P ＜0.05).结论 SPAG9促进前列腺癌细胞PC3的增殖、细胞周期及侵袭转移等生物学行为,并可能通过ERK和JNK信号通路发挥这些作用.
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SPAG9调控前列腺癌迁移侵袭能力的研究
目的 探讨SPAG9对前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其分子机制.方法 应用RNA干扰技术下调SPAG9在前列腺癌细胞中的表达,采用Western blot方法评估SPAG9基因干扰效果.采用Transwell实验比较SPAG9干扰前后前列腺癌细胞DU145、PC3的迁移与侵袭能力的改变.用CCK8细胞增殖实验分析SPAG9基因沉默对前列腺癌细胞DU145、PC3增殖能力的影响.用Western blot实验研究SPAG9基因沉默对前列腺癌细胞中MMP-2及TIMP-2蛋白表达的影响.结果 特异性SPAG9基因的干扰RNA(siRNA)能够有效沉默DU145、PC3前列腺癌细胞株中SPAG9蛋白的表达.SPAG9敲低后的前列腺癌细胞株迁移与侵袭能力显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).siSPAG9组DU145和PC3细胞中MMP 2的蛋白表达水平比siCtrl组显著降低,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05),而TIMP-2的表达量显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).SPAG9基因沉默后并不影响DU145及PC3细胞的增殖,组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SPAG9基因通过激活MMP-2信号通路增强前列腺癌细胞的迁移与侵袭能力.
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精子相关抗原9在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义
目的:探讨精子相关抗原9 (sperm-associated antigen 9,SPAG9)在膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)中的表达并分析其临床意义.方法:选取经临床病理诊断的BTCC标本98例,正常膀胱组织30例,应用免疫组化染色方法检测SPAG9在BTCC中的表达和分布情况,分析其与肿瘤的临床分期、病理分级及2年复发率的关系.结果:SPAG9在正常膀胱组织中为阴性表达,而在BTCC组中的阳性表达率为75.5％ (74/98),并且随着肿瘤分期和分级的升高SPAG9蛋白的表达增加,SPAG9阳性表达率在病理分级G1、G2与G3级之间的差异有统计学意义(P＜0.05)；在临床分期Ta与T1组间的差异有统计学意义(P＜0.05)；SPAG9蛋白表达阳性的非肌层浸润性膀胱癌患者,其2年复发率显著高于阴性表达者(P＜0.05).结论:SPAG9蛋白在BTCC中呈高表达状态,可成为BTCC有意义的肿瘤标志物,并有可能作为判断BTCC侵袭力、监测复发的重要指标.阻断SPAG9表达有望成为膀胱癌靶向治疗的新靶点.
