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补肾活血法促进卵泡发育障碍模型大鼠卵巢颗粒细胞增殖的实验研究
目的 以颗粒细胞增殖为切入点探讨补肾活血中药复方新加归肾丸促卵泡发育的分子机制.方法 采用雷公藤多苷致卵泡发育障碍大鼠模型,分别给予高、中、低剂量新加归肾丸灌胃治疗2周,处死大鼠,摘取双侧卵巢,计算卵巢指数;卵巢组织HE染色,光学显微镜下测量颗粒细胞厚度;Taqman实时荧光定量PCR法、免疫组化法检测卵巢兔抗细胞周期蛋白D2(CyclinD2) mRNA和颗粒细胞CyclinD2蛋白的表达.结果 模型对照组大鼠卵巢指数、颗粒细胞厚度、CyclinD2 mRNA表达以及CyclinD2蛋白表达均较常对照组降低(P＜0.05或者P＜0.01);经不同剂量的新加归肾丸治疗后,以上指标均不同程度的升高,以中药高、中剂量组效果为明显(P ＜0.05或P＜O.01).结论 补肾活血中药复方新加归肾丸可能通过上调CyclinD2的表达,加速细胞周期进程,促使颗粒细胞的增殖,从而进一步促进卵泡发育.
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新加归肾丸对雷公藤致卵巢功能损害小鼠模型的影响
目的:以雷公藤多甙建立雌性育龄期小鼠生殖功能低下模型,用于探讨新加归肾丸改善生殖功能低下状态的作用机理.方法:将模型小鼠随机分为5组,每组15只,分别为新加归肾丸高、中、低剂量组、倍美力组、模型空白组,加上正常对照组共6组.连续给药3周,每日定时阴道上皮脱落细胞涂片.观察动情周期变化.第3周末取血、处死小鼠,采用放射免疫法检测血清E2、P、IGF-I水平,组织称重法计算卵巢、子宫指数,病理切片观察卵巢、子宫组织形态学变化.结果:与模型空白组相比,新加归肾丸组动情周期正常小鼠数量增加(P<0.05),卵巢、子宫的组织形态明显改善,高、中剂量组血清E2和P水平明显增高(P<0.01);模型组血清IGF-I与正常组相比显著升高(P<0.01),新加归肾丸各组IGF-I水平与正常组无显著性差异.结论:1、雷公藤多甙可造成雌性小鼠血清IGF-I异常升高,可能为雷公藤多甙致生殖功能损伤的机制之一;2、新加归肾丸能调节IGF-I在卵巢上的适量表达,促进卵泡发育和生长;3、新加归肾丸能改善子宫、卵巢的组织形态,调节卵巢激素水平,使紊乱的动情周期恢复正常.
