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运用蛋白质组学研究三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中核基质蛋白的变化
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对慢性粒细胞性白血病细胞系K562细胞核基质蛋白的影响. 方法:用DNA梯度电泳观察As2O3作用后K562细胞凋亡的情况.单向、双向电泳观察As2O3对K562细胞核基质蛋白分布影响. 结果:2.5 μmol/L As2O3处理72 h后,DNA电泳已能检测到发生凋亡的K562细胞,但早在As2O3处理48 h时, 即能观察到核基质蛋白分布的改变,此时尚不能观察到凋亡特征性的DNA片段梯形条带.双向电泳可检测出200多个核基质蛋白点,其中约18个点与As2O3处理相关. 结论:As2O3对K562细胞的影响是时间和剂量依赖性的.双向电泳检测As2O3对K562核基质蛋白分布的影响较DNA梯度电泳检测更为敏感.核基质蛋白成分可能是砷作用的靶蛋白,并且可能是药物发挥抗癌作用的关键点之一.
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SATB1蛋白在人前列腺癌组织中的表达及临床意义
目的 研究SATB1蛋白在人前列腺癌(PCa)组织中的表达及临床意义.方法 免疫组化法结合组织芯片技术检测116例PCa标本和34例良性前列腺增生(BPH)对照组织中的SATB1的表达状况,并分析其临床病理意义.结果 (1)在PCa组织中SATB1表达率75.9％(88/116),与BPH组织表达率17.6％ (6/34)相比差异有统计学意义(P＜0.01). (2) SATB1在PCa组织的表达随着PCa的病理分级、临床分期增加而表达增强(P＜0.05),与PCa的病理分化程度负相关(P＜0.01),与PCa的临床分期呈正相关(P＜0.01).结论 SATB1在PCa中高表达,且与其病理分级、临床分期有密切相关,检测SATB1的表达有助于对PCa的病理分级及临床分期和预后的判断.
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恶性黑素瘤细胞中的谷氨酸信号通路及其与细胞骨架蛋白分子的作用机制
目的 探讨谷氨酸受体通路对恶性黑素瘤(恶黑)细胞树突形态以及细胞骨架蛋白的作用.方法 激光共聚焦显微镜及原子力显微镜分析微管相关蛋白2a(MAP2a)、离子型谷氨酸受体(NMDAR2A)、代谢型谷氨酸受体(mGluR1)在人侵袭性恶黑细胞中的亚细胞定位,以及NMDAR拮抗剂MK-801及mGluR1拮抗剂CPCCOEt对微管蛋白分布、细胞树突形态的作用.测定细胞生长曲线,观察MK-801及CPCCOEt对恶黑细胞增殖的影响.结果 研究发现,上述分子具有相似的亚细胞分布:均主要位于细胞树突内;MK-801及CPCCOEt均可使细胞树突内微管密度增加,使恶黑细胞树突化;且与MAP2a具有协同作用;MK-801及CPCCOEt均对恶黑细胞增殖具有显著抑制作用.结论 谷氨酸受体通路参与恶黑细胞树突发育的生理功能,谷氨酸受体拮抗剂可抑制恶黑细胞增殖.
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尿液中核基质蛋白22联合端粒酶活性检测在膀胱癌诊断中的作用
9%. 结论 联合检测可使在维持较高敏感性的前提下,大大提高诊断的特异性,其特异性与细胞学检测相差较小,而敏感性却远高于细胞学检测,因而联合检测较单一指标的检测对膀胱癌具有更高的诊断价值.
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BLCA-4在膀胱癌患者早期诊断及术后监测肿瘤复发中的意义
目的 探讨尿液中膀胱癌特异性核基质蛋白-4(bladder cancer specific nuclear matrix protein-4,BLCA-4)对于诊断膀胱癌及术后监测膀胱癌复发的临床意义.方法 选取2012年2月至2016年1月在本院经病理学证实的膀胱癌患者87例(膀胱癌组),与泌尿系统良性病变患者30例(良性组)、正常健康人30例(健康组)进行比较.检测三组尿液中BLCA-4水平,术后24个月随访患者的复发情况,比较术前、术后1个月、6个月、24个月的尿BLCA-4水平.结果 膀胱癌组术前尿液中BLCA-4水平显著高于良性组、健康组,差异具有统计学意义(P＜0.05);良性组的尿液中BLCA-4水平显著高于健康组(P＜0.05);尿液中BLCA-4水平鉴别诊断膀胱癌的灵敏度为95.00％、特异度为96.67％、漏诊率为5.00％、误诊率为3.33％、ROC曲线下面积AUC值为0.949、尿液中BLCA-4水平鉴别诊断膀胱癌与病理结果的一致性kappa值为0.916;复发患者术后6个月、24个月的尿液中BLCA-4水平显著高于为未复发患者(P＜0.05).结论 尿液中BLCA-4水平鉴别诊断膀胱癌具有一定的临床价值,术后对其进行监测有利于早期发现术后复发.
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正常乳腺与乳腺癌核基质蛋白的双相电泳-飞行时间质谱研究
目的:应用比较蛋白质组学方法分析正常乳腺与乳腺癌组织的差异表达核基质蛋白,为人乳腺癌发病机制及其早期诊断的研究提供理论依据.方法:应用双相电泳(2-DE)每组分离4例乳腺组织核基质蛋白;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得差异蛋白点的肽质量指纹图谱(PMF);通过Mascot软件查询NCBI数据库鉴定蛋白质.结果:每张图谱约检测到900个蛋白质点,共发现27个差异表达蛋白,选择背景清晰、重复性及分辨率较好、蛋白表达差异明显的点进行质谱分析,结合表观分子质量及等电点,初步鉴定了12种蛋白质.结论:这些差异蛋白质部分有望成为乳腺癌诊断及治疗的分子标志物.
