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戊二醛固定化脂肪酶活性包涵体的性质研究
目的 考察戊二醛(GA)交联的黏质沙雷氏菌ECU1010脂肪酶活性包涵体的酶学性质.方法分别对游离酶和固定化酶的pH稳定性、热稳定性、km值、有机溶剂和金属离子耐受性进行研究,同时考察固定化酶的操作稳定性和贮存稳定性.结果固定化酶在pH5.0～10.0稳定性较好；60℃以下仍可斯持48％以上的酶活；对亲水性有机溶剂和金属离子的耐受性增强；操作稳定性和贮存稳定性大有提高.结论脂肪酶活性包涵体经固定化后其稳定性显著提高.
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响应面法优化脂肪酶活性包涵体固定化条件
目的 优化Serratia marcescens ECU1010脂肪酶活性包涵体的固定化条件.方法 利用Plackett-Burman试验设计筛选影响固定化过程的几项因素,用陡爬坡实验逼近大响应区域,采用Box-Behnken试验设计及Design-Expert软件对实验结果进行二次回归分析.结果 戊二醛(GA)浓度,酶浓度,GA与酶用量比对固定化过程的影响较显著.通过求解回归方程得到佳固定化条件:GA浓度0.13％(w/v),酶浓度16.5 mg/mL,GA与酶用量比11:2.结论 在优化条件下,固定化酶的酶活性可达426.6 U/L,预测值与验证实验平均值基本相符.
关键词： 脂肪酶活性包涵体 固定化 Plackett-Burman设计法 响应面法 优化 -
戊二醛交联法固定化脂肪酶活性包涵体的研究
目的:以戊二醛(GA)为交联剂固定化黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶活性包涵体.方法:单因素优化固定化条件,以GA浓度、酶浓度、GA与酶用量比、固定化时间4因素3水平正交试验确定佳固定化条件,并研究固定化酶的操作稳定性和贮存稳定性.结果:佳固定化条件为:GA浓度0.15%(w/v),酶浓度15mg/mL,GA与酶用量比6:1,固定化时间2h.此条件下制备的固定化酶平均酶活达234.7U/L,酶活回收率40%以上.固定化酶重复使用6次后仍能保持50%的酶活.4℃贮存3个月后其酶活基本无明显减弱.结论:脂肪酶活性包涵体经固定化后其操作稳定性和贮存稳定性显著提高.
