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苦豆子赖氨酸脱羧酶基因表达与苦参碱和氧化苦参碱含量的关系
目的 研究干旱胁迫下苦豆子子叶中赖氨酸脱羧酶(lysine decarboxylase,LDC)基因表达量与苦参碱(matrine,MA)和氧化苦参碱(oxymatrine,OMA)含量的关系.方法 以不同质量分数PEG 6000胁迫萌动苦豆子种子,72 h后高效液相色谱(HPLC)测定其苦参碱和氧化苦参碱含量,荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)测定赖氨酸脱羧酶表达量.结果 萌动苦豆子种子在轻度胁迫(PEG质量分数＜15％)下,子叶中苦参碱和氧化苦参碱含量降低,重度胁迫(PEG质量分数＞20％)下,子叶中苦参碱和氧化苦参碱含量升高.荧光定量PCR显示,子叶中赖氨酸脱羧酶表达量随胁迫加剧呈先降后升的趋势,特别是在轻度和重度胁迫下,赖氨酸脱羧酶表达量与苦参碱和氧化苦参碱含量变化一致.结论 苦豆子子叶中苦参碱和氧化苦参碱含量与赖氨酸脱羧酶的表达有一定的关系.
关键词： 苦豆子 氧化苦参碱 赖氨酸脱羧酶基因(LDC) 荧光定量PCR 基因表达 -
湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲分布及与LDC表达的关系
目的:测定湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量,分析石杉碱甲分布与赖氨酸脱羧酶基因(LDC)表达的关系.方法:采用HPLC测定蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量,HPLC条件:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.08 mol/L醋酸铵(32:68,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为308nm.以肌动蛋白基因为内参物,通过半定量RT-PCR比较LDC在根、茎、叶中的表达量.结果:石杉碱甲在0.5～10.0 μg/mL线性关系良好,平均加样回收率为102％,RSD为0.32％;湘西蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量分别为(118.35 ±0.77) μg/g、(411.09±2.47) μg/g、(562.15±2.86) μg/g;半定量RT-PCR分析表明LDC在根、茎、叶中表达量无明显差异.结论:湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量差异显著;推测赖氨酸脱羧酶不是石杉碱甲生物合成中的关键酶.
