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达玛烯二醇Ⅱ文献资料
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创建酿酒酵母细胞工厂高效生产人参皂苷前体达玛烯二醇Ⅱ
人参皂苷是名贵药材西洋参和人参的主要活性成分,其中达玛烯二醇Ⅱ为人参皂苷类成分生物合成途径中的重要中间体.为构建高产人参皂苷前体达玛烯二醇Ⅱ的细胞工厂,本研究在优化过甲羟戊酸途径(MVA途径)工程菌的基础上,通过基因模块组合优化的方法获得能显著提高三萜前体的功能模块C30-M:分别由丹参法尼基焦磷酸合酶(SmFPS)和拟南芥鲨烯合酶(AtSQS2)组成,其鲨烯的含量能达到67.4 mg·g-1,约占细胞干重的6.74％;在进一步工作中,发现来源于拟南芥的2,3-环氧鲨烯合酶(AtSQE2)能提高下游中间体羊毛甾醇的产量到47.9 mg·g-1,为对照菌含量的22倍;然后,通过调控达玛烯二醇Ⅱ合酶基因的表达和采用反义RNA技术对麦角固醇合成途径中的ERG7基因进行调控及发酵工艺优化等策略,首次将三萜合成通量提高到10 g·L-1级别,创建出产量能达到15 g·L-1达玛烯二醇Ⅱ的高效酵母细胞工厂,为达玛烷型人参皂苷的产业化合成奠定了坚实的基础.
