首页 > 文献资料
-
不同玻璃化冷冻方法对家兔卵巢组织形态学c-kit和Ki67表达的影响
目的 探讨佳的玻璃化冷冻方案.方法 12只家兔随机分配到新鲜组(A)、麦管组(B)、微滴组(C)及SSV组(D)后行组织形态学分析及免疫组化检测.结果 A组始基卵泡的形态正常率为91.97%,与之相比,冷冻组B-D组冻融后始基细胞形态正常率分别是69.88%、71.22%、81.06%.较对照组明显下降,有显著性差异(P<0.05);D组中始基卵泡形态正常率高,与B、C组相比差异有显著性(P<0.05);B、C组比较,差异无显著性(P>0.05);各冷冻组合并后始基卵泡的形态正常率为74.03%,初级卵泡形态正常率为64.66%.比较有统计学差异(P<0.05);免疫组化显示:冷冻组复苏后卵巢组织中始基和次级卵泡中c-kitR和Ki67的阳性表达率分别是63.07%、67.11%、66.67%及72.77%、75.46%、75.14%,与对照组(68.23%及77.83%)相比,均无统计学意义(P>0.05).结论 3种玻璃化冷冻方法对卵巢皮质中各级卵泡及其结构均造成一定程度的损害,使各级卵泡的形态正常率明显下降,卵巢间质细胞连接变得疏松;SSV法明显优于其他两种玻璃化冷冻方法.较适合卵巢组织中始基卵泡的保存;冻存卵巢组织对初级卵泡的影响大于始基卵泡.三种玻璃化冷冻方法对家兔卵巢组织c-kit和Ki67的表达均无明显影响;三种冷冻复苏方法均能较好的保存家兔卵巢组织中卵泡生长发育的启动、增殖活性.
-
昆明小鼠未成熟卵母细胞OPS和SSV冷冻保存的比较
目的 寻找昆明小鼠卵母细胞冷冻保存效率的新途径.方法 选用5～6周龄雌性昆明小鼠的未成熟卵母细胞,在不同前处理液(10%EG或10%EG+10%DMSO)中平衡5 min,然后在冷冻液(EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40)中平衡30 s后进行OPS(Open pulled straw)法和SSV(Solid-surface vitrification)法玻璃化冷冻保存.结果 小鼠未成熟卵母细胞的OPS法冷冻保存中,用EFS液冷冻的卵母细胞解冻后形态正常率高为84.4%,成熟率低于16.7%;而在SSV法冷冻保存中,用EFS液冷冻的卵母细胞解冻后形态正常率高为86.0%,成熟率为46.5%.OPS法和SSV法冷冻小鼠未成熟卵母细胞形态正常率为91.6%和91.4%,与对照组间差异较显著(P＞0.01);成熟率为42.9%和59.1%,与对照组差异极显著(P＜0.01).结论 多种抗冻保护剂组合使用效果好于单种抗冻保护剂;EDFS冷冻液冷冻保存效果好于EFS,尤其是EDFS30;OPS法可以有效地冷冻保存小鼠未成熟卵母细胞,且新型玻璃化冷冻法SSV法冷冻保存效果优于OPS法.
