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不同细胞移植修复兔全层关节软骨缺损的比较研究
目的:比较软骨细胞、骨髓基质细胞及成纤维细胞对全层关节软骨缺损的修复作用.材料和方法: 取幼兔的软骨细胞、骨髓基质细胞及成纤维细胞,共3种有生成软骨潜力的细胞进行体外分离培养;以聚乳酸(PLA)为载体,将培养的原代细胞植入PLA支架上,形成细胞-PLA复合物.于28只成年新西兰大白兔的股骨滑车关节面上造成直径4.5mm、深3.0mm的全层关节软骨缺损,将3种细胞-PLA复合物分别植入关节软骨缺损处.植入细胞-PLA复合物为实验组,单纯植入PLA支架为对照组.术后6周、12周观察缺损修复情况及新生组织类型.结果: 软骨细胞移植组为软骨样组织修复,分界明显,甲苯胺兰及Ⅱ型胶原染色阳性;软骨下骨部分重建;细胞排列紊乱.骨髓基质细胞移植组为软骨样组织修复,分界不明显,甲苯胺兰及Ⅱ型胶原染色阳性;软骨下骨重建良好,软骨下潮线恢复;细胞排列趋于正常.成纤维细胞移植组为纤维组织修复,甲苯胺兰及Ⅱ型胶原染色阴性;软骨下潮线消失.对照组为纤维组织修复.结论: 软骨细胞、骨髓基质细胞移植修复软骨缺损明显优于成纤维细胞及对照组.骨髓基质细胞与软骨细胞移植组的修复结果无统计学差异,但骨髓基质细胞修复组织的细胞排列有序,软骨下骨重建良好,与周围组织融合密切,更接近正常软骨;但是12周时部分修复组织有纤维样退变.长期结果尚需进一步研究.
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PLA纤维毡对HCT-8细胞毒性试验
目的:探讨不承载任何药物的空白PLA纤维毡对人结肠癌细胞HCT-8毒性作用.方法:以聚乳酸(PLY)作为载体材料,使用电纺丝技术制备成纤维毡(不加任何药物),采用MTT法检测PLA纤维毡提侵液是否对HCT-8有毒性作用,流式细胞术对其进行细胞周期分析,倒置显微镜观察细胞形态学变化.结果:不承载任何药物的空白PLA纤维毡提侵液作用细胞48 h后,呈0级和1级毒性,流式细胞术表明,加入空白PLA纤维毡提侵液细胞与对比组的细胞在Go/G1期、s期、G2/M期均无明显差异.倒置显微镜下观察,加入空白PLA纤维毡提侵液细胞与对比组的细胞无差异,细胞状态良好,生长旺盛.
关键词： 聚乳酸(PLA) 人结肠癌细胞(HCT-8) -
PLA纤维毡对HCT-8细胞毒性试验
目的:探讨不承载任何药物的空白PLA纤维毡对人结肠癌细胞HCT-8毒性作用.方法:以聚乳酸(PLY)作为载体材料,使用电纺丝技术制备成纤维毡(不加任何药物),采用MTT法检测PLA纤维毡提侵液是否对HCT-8有毒性作用,流式细胞术对其进行细胞周期分析,倒置显微镜观察细胞形态学变化.结果:不承载任何药物的空白PLA纤维毡提侵液作用细胞48 h后,呈0级和1级毒性,流式细胞术表明,加入空白PLA纤维毡提侵液细胞与对比组的细胞在Go/G1期、s期、G2/M期均无明显差异.倒置显微镜下观察,加入空白PLA纤维毡提侵液细胞与对比组的细胞无差异,细胞状态良好,生长旺盛.
关键词： 聚乳酸(PLA) 人结肠癌细胞(HCT-8) -
新型PLA-PVP两亲性共聚物性能的初步研究
利用烯类单体甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)的羟基引发消旋-丙交酯(D,L-LA)开环聚合,制备了末端双键功能化的聚乳酸大分子单体(PLA-HEMA).将功能化的聚乳酸大分子单体与N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)共聚,合成了兼有亲水性PVP主链和疏水性PLA支链的两亲性接枝共聚物,这种亲-疏水性微相分离结构与人体内血管结构相似,非常有利于细胞的粘附和生长;而共聚物同时又具备PLA良好的力学性能,故可望在组织工程研究中得到广泛应用.
关键词： 聚乳酸(PLA) 聚乙烯基吡咯烷酮(PVP) 生物相容性 血液相容性 组织工程 -
同种异体组织工程软骨修复气管壁缺损的实验研究
目的探讨以同种异体的软骨细胞作为种子细胞,可吸收材料PLA作为支架,应用组织工程学方法形成的新生软骨组织修复动物气管壁缺损的可行性.方法将出生3～5 d的新西兰大白兔乳兔四肢关节软骨组织酶解,分离出软骨细胞,接种到PLA可吸收支架上,移植到成年新西兰大白兔的背部皮下,7周后形成新生软骨组织修复实验动物颈部气管前壁约10 mm×10 mm大小的缺损,术后观察8周,组织标本行大体观察和组织学检查.结果软骨细胞-PLA复合物在同种异体的动物体内形成新生组织,经组织学染色,证实为软骨组织.新生组织工程软骨修复动物气管壁缺损后8周,气管管腔通畅,无狭窄;组织学染色证实修复处软骨组织生长良好,无坏死?p吸收.结论同种异体幼年动物的软骨细胞-PLA复合物在有免疫力的动物体内形成的组织工程软骨可以作为气管壁缺损的修复材料.
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包载 rhBMP-2和 SDF-1的双层纳米微球的构建及体外释药研究
目的：构建搭载基质细胞衍生因子1（SDF-1）和人骨形态发生蛋白2（rhBMP-2）的双层纳米微球缓释系统，研究其体外释药特性。方法：用“乳化-溶剂挥发法”制备聚乳酸／壳聚糖（PLA ／CS）双层纳米微球，通过正交试验获得佳制备参数；动态光散射法测定纳米微球的粒径，电镜观察纳米微球的形态；在乳化过程中将 rhBMP-2和 SDF-1依次加入纳米微球中，计算其包封率和载药量，透析袋扩散法检测其体外缓释效果。结果：制备的双层纳米微球外形圆整，表面光滑，平均粒径为（542．33±14．38）nm，微球之间无粘连。rhBMP-2包封率为（82．41±1．05）％，载药量为（24．67±0．43）ng／mg；SDF-1包封率为（75．58±0．84）％，载药量为（22．63±0．41）ng／mg。药物释放持续至少30 d，呈“双相释放”。第30天时累计释放的 rhBMP-2和 SDF-1分别为72．85％和91．01％。结论：成功制备了包裹 SDF-1和 rhBMP-2的双层载药微球，形态良好，包封率较高，体外缓释效果较好。
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同轴静电纺丝法制备OPG-PLA/壳聚糖纳米纤维膜及相关性能研究
目的:利用同轴静电纺丝技术制备骨保护素-聚乳酸(OPG-PLA)/壳聚糖电纺纤维膜,评价其相关理化性能.方法:分别制备同轴OPG-PLA/壳聚糖电纺纤维膜和PLA/壳聚糖电纺纤维膜.SEM观察两种纤维膜表面形貌并测量纤维直径,透射电镜鉴定同轴结构,生物力学测试仪测量纤维膜力学性能,并测定纤维膜降解质粒释放率.结果:所制备的同轴OPG-PLA/壳聚糖电纺纤维与PLA/壳聚糖电纺纤维直径均匀,纤维光滑,方向随机,无串珠.同轴OPG-PLA/壳聚糖电纺纤维和PLA/壳聚糖电纺纤维的直径分别为(468±53)nm和(375±65)nm(P<0.05),拉伸强度分别为(1.85±0.37)MPa和(4.23±0.51)MPa(P<0.05)、弹性模量分别为(12.58±1.73)MPa和(13.26±2.79)MPa(P>0.05),质粒释放较平稳,可持续30 d 以上.结论:采用同轴静电纺丝法制备OPG-PLA/壳聚糖电纺纤维膜形态良好,力学性能符合要求,具有缓释效果.
