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miR-485-3p通过靶向TLR1/NF-κB信号通路调节胃癌细胞放射敏感性
目的:研究miR?485?3p是否通过靶向TLR1对胃癌细胞放射敏感性起作用。方法分别用qRT?PCR和蛋白印迹法检测miR?485?3p和TLR1的表达变化,DIANA、TargetScan和miRanda软件预测和双荧光素酶报告实验验证 miR?485?3p 对 TLR1的靶向作用。将 miR?485?3p mimic 或TLR1 siRNA转染到胃癌MGC803细胞中,放射处理细胞,凋亡实验、克隆形成实验和MTT检测细胞放射敏感性的变化。双荧光素酶报告实验检测miR?485?3p上调和TLR1沉默对NF?κB活性的影响。蛋白免疫印迹实验探究miR?485?3p上调和TLR1沉默对NF?κB靶基因的影响。结果放射处理后胃癌细胞miR?485?3p表达下调,TLR1表达上调。靶基因预测软件发现TLR1可能是miR?485?3p的靶基因,双荧光素酶报告实验进一步验证了TLR1是miR?485?3p的直接靶点。 miR?485?3p负调控TLR1的表达。 miR?485?3p的过表达提高了细胞凋亡率,降低了细胞克隆形成和细胞群体增殖能力,增强了细胞的放射敏感性,且TLR1的沉默也具有相同作用。 miR?485?3p上调和TLR1沉默均降低了NF?κB的活性,下调了NF?κB多个靶基因的表达。结论 miR?485?3p可能通过靶向TLR1调控NF?κB信号通路增强胃癌细胞的放射敏感性。