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经典型霍奇金淋巴瘤中大细胞与小细胞亚系生物学特性比较
目的:探究经典型霍奇金淋巴瘤细胞系L428中大小细胞亚系生物学特性差异及其意义.方法:应用有限稀释法分离出L428中大小细胞亚系并进行传代培养,分别命名为L428-big和L428-small细胞.免疫细胞化学实验检测L428中大小细胞亚系CD15和CD30表达差异,MTT实验检测L428中大小细胞亚系增殖能力的差异;流式细胞术检测L428中大小细胞亚系的凋亡差异.结果:成功分离出L428细胞株中大小细胞亚系并进行传代培养;免疫组化显示L428-big细胞的CD15及CD30表达明显强于L428-small细胞;MTT实验显示,L428-big细胞和L428-small细胞之间增殖能力差异有统计学意义,F=565.273,P＜0.001,L428-small细胞增殖能力高于L428-big细胞,P＜0.001;流式细胞术显示,L428-big细胞的凋亡率为(3.3±0.1)％,明显多于L428-small细胞(0.4±0.1)％,P＜0.001.结论:L428-small细胞增殖能力强,凋亡少,为经典型霍奇金淋巴瘤细胞起源的进一步研究提供一定的实验基础.
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CD99基因转染对霍奇金淋巴瘤L428细胞株表型、细胞周期与凋亡的影响
目的:观察CD99基因转染对霍奇金淋巴瘤L428细胞株表型、细胞周期与凋亡的影响.方法:L428细胞分为3组:转染CD99基因组、转染空质粒组及空白对照组.采用免疫细胞化学方法检测3组细胞CD15、CD30与CD99的表达,并用流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡.结果:与其他2组相比,转染CD99基因组L428细胞CD15、CD30表达消失,但可检测到CD99的表达.3组细胞周期分布存在差异,转染CD99基因组细胞阻滞于G2/M期(F=24.85,P＜0.001).3组细胞凋亡率相比,差异有统计学意义(F=45.30,P＜0.001),其中转染CD99基因组细胞凋亡率为(12.7±4.6)%,高于转染空质粒组的(4.0±0.9)%和空白对照组的(3.6±1.6)%(P＜0.05).结论:CD99基因可能在霍奇金淋巴瘤的发生中起重要作用.
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mic2/CD99基因克隆及在霍奇金淋巴瘤L428细胞株中表达
目的 克隆mic2/CD99基因并表达于L428细胞株.方法 通过PCR及双酶切方法.从Jurkat细胞基因组RNA中获得mic2/CD99全长基因编码序列.克隆到pcDNA3.1(+)质粒载体上,构建包含mic2/CD99全长基因载体;用脂质体转染法将mic2/CD99全长基因载体转染至L428细胞系;并从分子水平验证其存在.结果 RT-PCR方法扩增出大小为558 bp片段,序列测定其编码序列正确,酶切鉴定亚克隆序列正确.结论 成功构建了mic2/CD99全长基因载体,并稳定转染于L428细胞株中.
