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生存素反义寡核苷酸促进顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡
目的:探讨生存素(survivin)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide, ASODN)对顺铂(diamminedichloroplatinum, DDP)诱导骨肉瘤细胞凋亡的促进作用.方法:通过合成靶向survivin的ASODN转染骨肉瘤OS-732细胞并与DDP联合作用,同时设空白对照组、正义(SODN)组及DDP组进行比较.采用RT-PCR、免疫细胞化学法检测各组细胞survivin mRNA和蛋白表达状态,流式细胞仪(flow cytometry, FCM)、吖啶橙/溴化乙锭(acridine orange/ethidium bromide, AO/EB)染色法检测各组细胞凋亡水平和形态,MTT法检测细胞生长抑制情况.结果:与空白对照组、SODN组及DDP组相比,ASODN转染组细胞survivin mRNA及蛋白表达明显减弱,细胞凋亡水平较空白对照组、SODN组相应提高,细胞萎缩、染色质浓缩呈典型凋亡改变,细胞生长相对受抑;上述指标在ASODN+DDP组变化更为明显,其细胞凋亡指数(apoptotic index, AI)和细胞生长抑制率(inhibition ratio, IR,61.36%)明显高于各单"药"组(SODN组6.81%、ASODN组31.82%和DDP组41.35%)及SODN+DDP组(45.45%),P<0.05.结论:ASODN能够特异性封闭骨肉瘤OS-732细胞中survivin基因表达,使其功能相应受抑,增加细胞对DDP敏感性,进而增进DDP诱导骨肉瘤细胞凋亡效应.
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人类pygo1基因的生物信息学分析
目的:对人类pygo1基因编码蛋白质进行结构和功能预测.方法:利用生物信息学方法和工具对PYGO1蛋白质理化性质、跨膜区域、二级结构、亲(疏)水性进行分析.结果:PYGO1蛋白氨基酸残基组成中脯氨酸含量高,分子式C1943H2937N577O635S18,相对分子质量45,等电点6.38;可能为非跨膜的亲水性蛋白;α-螺旋和无规卷曲为其主要结构元件,含有一个植物同源结构域.结论:人类pygo1基因可能作为转录因子与其他蛋白共同作用调节心脏发育及心脏病的发生过程.
