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抗人 B7-2文献资料
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T n5细胞中单链抗体基因抗人重组质粒分子的表达分析
目的:研究 Tn5细胞中单抗抗人重组质粒(B7‐2)基因的表达及其活性。方法基于具备信号肽单抗抗人B7‐2构建,构建系统 Bac‐to‐Bac 并含单抗抗人 B7‐2杆状重组病毒 AcBacmid 单抗 B7‐2,对 Tn5细胞采用不同感染复数(MOI)实施感染,进行24、48、72 h 不同时点细胞蛋白活性的分泌表达,并分析人外周血中单个核细胞受Raji 刺激呈增殖表达,予以单抗抑制的效果。结果应用不同 MOI 对 Tn5细胞感染,达72 h 后进行细胞收集,予以聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE‐SDS)分析,其 MOI 为1~10表达目的蛋白的量,确定佳 MOI 为5;M TT 法下自动酶标仪波长570 nm 位置吸光度,其吸光值的大小同细胞 PBMC 增殖可呈正相关;各组吸光值显示细胞Raji 刺激外周血单个核细胞(PBMC)呈增殖表达,单抗抗人 B7‐2可以抑制 Raji 细胞刺激 PBMC 出现的增殖效应。结论单抗 B7‐2抗原抗体相结合的活性,以及对 PBMC 产生的抑制效应均存在,但未见单抗 B7‐2效应明显表达,有待进行更进一步的试验研究。