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中介体复合物亚基19基因沉默对人膀胱癌细胞增殖和成瘤影响的实验研究
目的 研究中介体复合物亚基19(midiato complex subunit 19,Med19)基因沉默对人膀胱癌T24细胞株增殖和成瘤作用的影响. 方法 应用shRNA慢病毒载体感染T24人膀胱癌细胞沉默Med19基因,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测未感染组、阴性对照感染组以及shMed19感染组细胞的Med19基因表达情况；流式细胞仪分析各组细胞周期的变化；噻唑蓝(MTT)实验、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入实验、克隆形成实验评估肿瘤细胞增殖和生长能力；将T24细胞接种于裸鼠,进行小鼠成瘤实验,检测肿瘤细胞的致瘤能力. 结果 Med19-shRNA慢病毒感染T24细胞后,感染组Med19 mRNA表达相对含量为0.35 ±0.03,与未感染组0.75±0.07和阴性对照组1.00±0.07比较差异有统计学意义(P＜0.05)；感染组Med19蛋白表达量与未感染组和阴性对照组比较有明显差异；感染组G0/G1期细胞比例为(77.50±0.29)％,与未感染组(69.81±0.81)％和阴性对照组(67.53±0.67)％比较差异有统计学意义(P＜0.05)；MTT和BrdU实验表明感染组细胞存活数量和DNA合成较未感染组和阴性对照组显著降低(P＜0.05)；克隆形成实验中感染组克隆数量为(91.33±6.11)个,较未感染组(179.00±18.36)和阴性对照组(191.00±19.16)显著减少(P＜0.05)；小鼠成瘤实验中,24 d时感染组肿瘤体积为(596.64±485.36)mm3,质量为(0.57±0.44)g,与未感染组(2611.40±396.68) mm3和(1.94±0.60)g,阴性对照组(2463.21±1451.66) mm3和(2.17±1.75)g,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Med19基因沉默后人膀胱癌T24细胞的生长、增殖和成瘤能力均受到显著抑制,提示Med19基因在膀胱癌形成过程中具有重要作用.使用shRNA技术抑制Med19基因表达有望成为膀胱癌新的治疗手段之一.
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人舌鳞状细胞癌组织Med19的表达及临床意义
目的 探讨中介体复合物19 (Med19)在人舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中的表达及临床意义.方法 收集2012年1月-2016年9月我院口腔颌面外科手术切除的TSCC与癌旁非肿瘤组织标本50例,利用免疫组织化学方法及Western blot方法分别检测Med19蛋白的表达情况,另取20例正常口腔组织行免疫组织化学染色作为对照.结果 TSCC组织中Med19蛋白表达水平与癌旁非肿瘤组织和正常口腔组织比较,差异有显著性(x 2=16.82,P＜0.05).TSCC组织中Med19蛋白的表达与淋巴结转移情况有关(x 2=9.67,P＜0.05);而与病人的性别、年龄及肿瘤的大小、分化程度、临床分期等无关(P＞0.05).结论 TSCC细胞转移可能与Med19蛋白异常表达密切相关,但其具体的发生机制仍需进一步研究.
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中介体复合物在真核细胞转录调控中的研究进展
中介体复合物作为转录过程中的重要辅因子,广泛参与了RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ,pol Ⅱ)调控的转录激活与抑制过程,其结构在进化上具有保守性.然而,由于中介体复合物结构与组成的复杂性和可变性,我们对其调控基因表达的机制仍知之甚少.近研究显示中介体复合物多种转录活性的调节与转变,可能与细胞周期素依赖性激酶8(cyclin-dependent kinase 8,CDK8)亚模块的可逆性结合与修饰密切相关.
关键词： 中介体复合物 转录 细胞周期素依赖性激酶8亚模块 -
RN A聚合酶Ⅱ转录调节物12基因突变在人类疾病发病中的研究进展
RNA聚合酶Ⅱ转录调节物12（MED12）是中介体复合物的一个亚基，在真核细胞中调节转录，并参与受体酪氨酸激酶、核受体和Wnt的信号通路。MED12分子的进化保守区域具有重要的转录调控功能，但是ME D12基因序列上也存在突变热点，这些位点的突变将会对ME D12蛋白的功能产生影响，终导致不同疾病的发生，如Opitz-Kaveggia综合征、Lujan 综合征、子宫肌瘤、前列腺癌等。该文围绕ME D12的突变位点及其产生的相关疾病进行综述，旨在为更好地了解ME D12基因的功能以及为临床诊断和治疗提供新的理念。
关键词： 核糖核酸聚合酶Ⅱ转录调节物12 中介体复合物 突变 疾病
