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Ad-hBMP-2／GFP 转染兔骨髓间充质干细胞体外骨生成的实验研究
目的：观察Ad-hBMP-2／GFP转染兔骨髓间充质干细胞（ BMSCs ）体外骨生成中钙化斑形成，并对钙化斑元素构成进行研究。方法用携带hBMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞，通过RT-PCR检测转染后BMSCs hBMP-2基因的表达，通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察转染后细胞形态改变和钙化斑的形成，结合扫描电镜和X线能谱分析（ SEM／EDS）技术观测钙化斑表面微观形貌及其元素构成。结果 RT-PCR检测转染后BMSCs表达hBMP-2目的基因，细胞形态向成骨方向分化，钙结节茜素红染色见红色矿化结节，电镜下见钙化灶点状散布于细胞中，细胞重叠生长，分泌基质旺盛。 X射线能谱分析显示其表面为钙、磷沉积物，其钙磷比（Ca／P）为1.53。结论 Ad-hBMP-2／GFP能成功转染兔BMSCs，体外诱导BMSCs向成骨方向分化，并具备较好的骨生成能力。
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番茄红素对急性肺损伤大鼠肺毛细血管膜通透性及骨形态生发蛋白-4基因表达的影响
目的:观察番茄红素(Lyc)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织毛细血管膜通透性及骨形态生发蛋白-4(BMP-4)mRNA基因表达的影响,探讨其对ALI的保护作用.方法:将Wistar大鼠随机分成3组:对照组(Ⅰ组)、ALI组(Ⅱ组),ALI+Lyc组(Ⅲ组),每组20只,每组中10只处死前注射伊文思蓝.从模型制备前1周开始,Ⅰ组和Ⅱ组用橄榄油、Ⅲ组用橄榄油稀释的番茄红素树脂(1g/L)以5ml/kg的剂量灌胃,1次/d.制备酸吸人大鼠ALI模型,测定ALI后6h肺毛细血管通透性、肺湿干质量比、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性及BMP-4 mRNA的表达.结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组肺组织中伊文思蓝提取量显著增加(P＜0.01),肺湿干质量比值、MPO活性显著升高(P＜0.05),BMP-4 mRNA表达水平显著上调(P＜0.05)；与Ⅱ组比较,Ⅲ组肺组织中伊文思蓝提取量显著降低(P＜0.05),肺湿干质量比值、MPO活性明显均不同程度降低(P＜0.05),BMP-4 mRNA的表达水平显著下降(P＜0.05).结论:番茄红素降低酸吸入致ALI大鼠的肺毛细血管通透性、肺湿干质量比及肺MPO活性,抑制BMP-4 mRNA表达,减轻ALI大鼠早期肺泡毛细血管膜损伤并可能改善后期肺组织的修复,具有肺保护作用.
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番茄红素对大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究
目的研究番茄红素(lycopene)对急性肺损伤(ALI)的保护作用并探讨其作用机制.方法采用酸吸入致大鼠ALI模型,测定ALI后6 h肺毛细血管通透性、肺湿干质量比(mW∶mD)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性并观察6 h、7 d、14 d肺组织病理学改变,研究番茄红素的肺保护作用;通过测定ALI大鼠血浆TNF -α、NO、MDA含量及肺组织羟脯氨酸(HYP)含量和SOD活性以及骨形态生发蛋白-4(BMP -4)mRNA的表达,探讨番茄红素的肺保护机制.结果番茄红素明显减轻酸吸入致ALI早期肺毛细血管通透性和炎性细胞浸润及后期肺纤维化,降低血浆TNF -α、NO、MDA及肺组织HYP含量,增加SOD活性,抑制因ALI诱导而上调的BMP -4 mRNA的表达.结论番茄红素对酸吸入致ALI具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化、抑制早期炎症因子及BMP -4基因表达有关.
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酸吸入致肺损伤对大鼠肺骨形态生发蛋白-4基因表达的影响
目的 观察酸吸入致急性肺损伤(ALI)对大鼠肺骨形态生发蛋白-4(BMP-4) mRNA表达的影响.方法 HCL(pH=1.5)滴入制备大鼠ALI模型,6小时后处死取肺组织标本,采用RT-PCR方法检测BMP-4 mRNA表达水平.结果 对照组BMP-4 mRNA表达水平为0.76±0.06;ALI组为0.87±0.14,较对照组显著升高.结论 酸吸入致大鼠ALI使肺组织BMP-4 mRNA的表达受诱导而上调,BMP-4 mRNA表达的改变可能与ALI的发生发展有关.
