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  • 纤维介素2对糖尿病大鼠心功能及肝细胞生长因子/c-Met信号通路影响的观察

    作者:刘兆玉;张迪泽;林江;陈登科;王玉兰;李强

    目的 探讨纤维介素2(Fgl 2)对糖尿病大鼠心功能及肝细胞生长因子(HGF)/c-Met 信号通路的影响. 方法 SD大鼠建立糖尿病模型后,随机分为模型对照(Con)组、空白慢病毒载体(BLV)组、Fgl 2基因低表达慢病毒载体(Fgl 2)组,同时选择10只正常SD大鼠作为正常对照(NC)组.4组大鼠分别单次尾静脉注射生理盐水、空白慢病毒载体、Fgl 2 基因低表达慢病毒载体(5×108 IU/ml)及生理盐水4周后,检测各组FBG、TC、TG、HDL-C和LDL-C,采用多普勒彩超分析各组左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期室壁厚度(LVWTd)、左室收缩末期室壁厚度(LVWTs)、短轴缩短率(FS)和左心室射血分数(LVEF),分别采用RT-PCR和Westen blot测定各组心室肌Fgl 2、HGF和c-Met mRNA和蛋白的表达. 结果 Con组、BLV组和Fgl 2组FBG、TC、TG、HDL-C和LDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Fgl 2组LVIDd、LVIDs、LVWTd和LVWTs较Con组或BLV组降低(P<0.05),FS 和LVEF较Con组或BLV组升高(P<0.05);Fgl 2组心肌HGF和c-Met mRNA水平较Con组或BLV组升高(P<0.05),而Fgl 2 mRNA水平较Con组和BLV组降低(P<0.05);Fgl 2组心肌HGF和c-Met 蛋白水平较Con组和BLV组升高(P<0.05),而Fgl 2蛋白水平较Con组和BLV组降低(P<0.05). 结论 慢病毒介导的Fgl 2基因低表达对糖尿病大鼠血糖及血脂无影响,但是可抑制心室重构,并且激活HGF/c-Met 信号通路,从而对心脏起保护作用.

  • 候选转移抑制基因通过调控肝细胞生长因子/c-Met信号通路影响膀胱癌BIU87细胞生物学功能的研究

    作者:牛卫星;李岗;赵宇峰

    目的 观察候选转移抑制基因(MTSS1)通过调控肝细胞生长因子(HGF)/c-Met信号通路对膀胱癌BIU87细胞生物学功能的影响.方法 培养膀胱癌BIU87细胞,将传代的细胞分为以下3组:A组:PEF MTSS1和PSV2neo共转染组;B组:阴性对照小干扰RNA (shNC)和PSV2neo共转染组;C组:未转染组,A组为实验组,B、C两组为阳性对照组和阴性对照组.通过Western blot和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测MTSS1蛋白和mRNA在3组细胞中的表达水平,并检测3组BIU87细胞中c-Met、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白和mRNA水平表达变化,并通过流式细胞法和划痕实验观察比较转染PEF MTSS1的BIU87细胞的的迁移能力和增殖凋亡情况.结果 (1) Western blot和Real-time PCR检测结果显示:与B、C组比较,PEF MTSS1组MTSS1蛋白及mRNA表达均显著下调(P<0.01),c-Met蛋白及其mRNA的表达显著下调(P<0.01).(2) Western blot和Real-time PCR检测结果显示:与B、C组比较,A组上皮标志物E-cadherin蛋白和及mRNA表达显著上调(P<0.01),c-Met蛋白及其mRNA,间质细胞标志物N-cadherin蛋白及mRNA的表达显著下调(P<0.01),B、C两组间E-cadhefin和N-cadherin蛋白及mRNA表达的差异无统计学意义(P>0.01).(3)划痕实验检测细胞迁移:结果表明,A组划痕间距较宽,愈合被抑制,BIU87细胞迁移能力低于B、C组细胞(P<0.01),B、C两组细胞的划痕间距差异无统计学意义(P>0.01).(4)流式细胞仪分析细胞凋亡:A、B和C组细胞的凋亡率分别为(26.73±3.72)%、(4.28±0.68)%和(2.73±0.41)%,A组细胞的凋亡率较C组明显增加(P<0.01),B、C两组细胞凋亡的差异无统计学意义(P>0.05).结论 MTSS1基因转染对体外膀胱癌细胞株BIU87细胞具有促进增殖和抑制凋亡作用,其可能是通过调控HGF/c-Met信号转导通路来发挥作用.

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