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活体生物萤光成像技术新进展
活体生物萤光成像技术(in vivo bioluminescence imaging)是近年来发展起来的一项崭新的分子、基因表达的分析检测系统.与传统的检测方法相比具有巨大的优越性,堪称是分子基因检测领域的革命性技术.随着萤光成像设备的进一步完善以及转基因动物的构建开发,在欧美等发达国家活体生物萤光成像技术已被广泛地应用于感染、肿瘤免疫及治疗、自身免疫性疾病、器官移植、基因治疗、药物开发等实验领域.本文就活体生物萤光成像技术的发展和应用作如下综述.
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聚乙二醇化聚酰胺-胺树状大分子的合成及作为基因载体的研究
目的 研究聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化聚酰胺-胺树状大分子(polyamidoamine dendrimer,PAMAM)的理化性质及其作为质粒DNA载体.方法 用1H-NMR考察PAMAM-PEG的化学结构;用琼脂糖凝胶电泳法、圆二色谱法和透射电镜法考察复合物的形成;用动态光散射法测定复合物的粒径和zeta电位;用MTT法测定复合物的毒性;用萤光素酶报告基因的表达表征复合物的转染效率.结果 结果表明,载体化合物合成成功,PEG修饰度为9％;琼脂糖凝胶电泳结果表明,在N/P比大于2时,复合物能阻滞DNA的电泳;圆二色谱、透射电镜结果表明复合物已经形成,其形态规整,呈球形.随着N/P比的增加,复合物的粒径减小,zeta电位升高;MTT结果表明复合物的细胞毒性小;萤光素酶实验结果表明复合物的转染效率高.结论 作为DNA载体,PAM-AM-PEG的细胞毒性小、转染效率高,具有很大的研究前景.
关键词： 聚乙二醇化聚酰胺-胺树状大分子 毒性 转染效率 萤光素 -
活体生物萤光成像技术及新进展
活体生物萤光成像技术(in vivo Bioluminescence Imaging)是近年来发展起来的一项崭新的分子、基因表达的分析检测系统.它由敏感的萤光照相机(charge coupled device camera,CCD camera)及其分析软件和作为报告子的萤光素酶(luciferase)和萤光素(luciferin)组成.
关键词： 活体生物萤光成像技术 萤光素 萤光素酶
