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反义Survivin核酸诱导凋亡及逆转胃癌耐药机制的实验研究
目的:探讨反义Survivin核酸(anti-pcDNA3-svv)对胃癌细胞系SGC7901的凋亡诱导、对泰索帝的化疗增敏作用及对化疗耐药的逆转作用.方法:采用脂质体转染法转染胃癌细胞系SGC7901,并筛选阳性克隆,以Western blot检测Survivin蛋白的表达,RT-PCR检测MDR-1mRNA的表达,用透射电镜及TUNEL法观察并检测转染后SGC7901的凋亡变化,采用MTT法检测转染细胞对泰索帝的敏感性.结果:转染anti-pcDNA3-svv的SGC7901细胞系(SGC7901-SVVanti)其Survivin蛋白比未转染者明显降低,仅为其29.9%(P＜0.01);透射电镜下可见转染组细胞呈凋亡晚期变化,TUNEL显示转染组与未转染组AI分别为0.241和0.083(P＜0.01);转染组MDR-1mRNA较未转染组明显降低,转染组与未转染组MDR指数分别为:0.196±0.013和3.126±0.019(P＜0.01);转染组对泰索帝的IC50值为16.7±1.98μg/L,而未转染组为55.7±1.89μg/L,差异具有显著的统计学意义(P＜0.01).结论:反义SurVivin核酸可诱导SGC7901细胞凋亡,增强泰索帝化疗敏感性,逆转耐药.
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反义survivin核酸增强胃癌细胞对多西他赛敏感性及其逆转耐药机制的探讨
目的 探讨反义survivin核酸(anti-pcDNA3-svv)对胃癌细胞系SGC7901的凋亡诱导和化疗增敏作用,及其与多药耐药基因(mdr-1)的相关性.方法 采用电转染法转染胃癌细胞系SGC7901,并筛选阳性克隆.以Western blot法检测survivin蛋白的表达,用透射电镜观察转染后对SGC7901的凋亡诱导作用,RT-PCR检测mdr-1 mRNA的表达,MTT法检测转染细胞对多西他赛的敏感性.诱导SGC7901细胞耐药,检测耐药mdr-1和survivin的表达.结果 转染anti-pcDNA3-svv的SGC7901细胞中,survivin蛋白表达较未转染组明显降低;透射电镜下,转染组细胞呈凋亡晚期变化;转染组的mdr-1 mRNA较未转染组明显降低,转染组与未转染组的MDR指数分别为0.196±0.013和3.126±0.019;转染组多西他赛的IC50值为(16.7±1.98)μg/L,而未转染组为(55.7±1.89)μg/L,差异有统计学意义.耐药SGC7901细胞的survivin mRNA表达随着mdr-1 mRNA表达增加而明显增强.结论 反义survivin核酸可诱导SGC7901细胞凋亡,增强多西他赛化疗敏感性,其逆转耐药的机制与mdr-1低表达有关.
关键词： 反义Survivin核酸 胃肿瘤 凋亡 多西他赛 多药耐药 -
反义Survivin核酸对荷瘤裸鼠放疗敏感性影响的初步研究
目的 探讨反义Survivin核酸(anti-pcDNA3-svv)对荷瘤裸鼠放疗敏感性的影响.方法 采用电转染法转染胃癌细胞系SGC7901,观察转染组(SGC7901-SVVanti)和未转染组(SGC7901)在体内(裸鼠)和体外(细胞水平)对放射线敏感性的不同;采用免疫组化SP法对比转染组和未转染组裸鼠肿瘤中Survivin蛋白表达的不同.结果 SGC7901-SVVanti组细胞随着照射剂量的升高,细胞存活率明显低于SGC7901组,其IC50分别为(718.7±1.6)cGY和(1654.1 ±1.2)cGY,差异具有统计学意义(P＜0.05);相同剂量的X线照射裸鼠后,SGC7901-SVVanti组裸鼠的肿瘤缩减率明显高于SGC7901组裸鼠,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 Survivin反义核酸可以在体内、外水平增加荷胃癌细胞裸鼠对放射线的敏感性;抑制Survivin蛋白在裸鼠肿瘤中的表达.
关键词： 反义Survivin核酸 SGC7901 裸鼠 放疗 免疫组化
