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不同pH值精子营养液对男性精液各参数的影响以及机制的初步探讨
目的 研究不同pH值的精子营养液对男性精液各参数的影响.方法 采用精子尾部低渗肿胀实验、毛细管穿透实验分别检测了15名健康供精者的精液在pH值分别为4.2、5.2、6.2、7.2(为实验对照组)、8.2、9.2、10.2、11.2下的精子的活动率、活力、肿胀率,毛细管爬高高度,同时使用比色法检测精液在不同pH值下精子的钠-钾交换ATP酶(Na+/K+-ATP酶)的活性变化.结果 精子在中性和偏碱的溶液中活力较强,在pH值为4.2、11.2时,由于溶液pH值过酸或过碱,精子活动被完全抑制.以pH=7.2为对照组,除pH值为8.2组外,其余各组在精子尾部肿胀率、毛细管爬高高度水平上与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);pH值为5.2、6.2、9.2、10.2各组在精子活动率、活力上与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).同时在pH值为5.2、9.2、10.2下的精子肿胀率与精子活动率有相关性(r值分别为0.633、0.729、0.713,P＜0.05),pH值为5.2、8.2、9.2、10.2下的精子肿胀率与精子的活力也有相关性(r值分别为0.546、0.532、0.826、0.723,P＜0.05).精子在低于或高于正常精液pH值条件下,Na+/K+-ATP酶的活性均有不同程度地下降,精子营养液在pH值为4.2、9.2、10.2、11.2时,Na+/K+-ATP酶的活性分别为(0.62±0.38)、(1.51±1.08)、(0.81±0.20)、(0.75±0.28)μmolPi/mgprot/hour,与对照组(pH=7.2)比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在低于或高于正常精液pH值条件下,氢离子浓度可能引起精子Na+/K+-ATP酶活性的下降,从而影响精子的活动率、活力、肿胀率和毛细管爬高高度,提示女性阴道pH环境改变也是引起不孕不育的原因之一.
关键词： 氢离子浓度 精子 Na+-K+交换ATP酶 -
白细胞过滤器去除血液中肿瘤细胞的可行性研究
目的 研究白细胞过滤器清除血液回收机漂洗后血液中残存肿瘤细胞的效果,并观察过滤后红细胞的形态学及其Na+-K+-ATP酶活性的改变.方法 选取胃肿瘤SGC-170细胞以及肠肿瘤LOVO细胞进行体外培养,待细胞消化后制成单一细胞悬液;采集非肿瘤患者术野血液,经过滤、离心、漂洗收集浓缩红细胞.将细胞悬液中的肿瘤细胞计数后混入浓缩的红细胞中,混匀,再用血液回收机过滤、离心、漂洗,将漂洗后得到的浓缩红细胞用白细胞过滤器过滤,观察过滤对血样中肿瘤细胞的影响并与未经过滤处理的对照组进行比较,同时测定红细胞中的Na+-K+-ATP酶,观察过滤对红细胞的影响.结果 过滤后的血样中未发现肿瘤细胞,而对照组血样中可见到肿瘤细胞.培养14天后观察,经白细胞过滤器过滤后的血样未见肿瘤细胞生长,而对照组血样中有大量肿瘤细胞生长.过滤后的红细胞形态学未发生明显改变,Na+-K+-ATP酶含量与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论 应用自体血液回收机配合白细胞过滤器,可有效去除血液中的肿瘤细胞,且对红细胞形态及其中Na+-K+-ATP酶活性无明显影响.
关键词： 细胞系 肿瘤 血液滤过 红细胞 Na+-K+交换ATP酶 -
复方中药天芪航力片对高+Gz应激大鼠心肌线粒体功能的影响
目的 研究复方中药天芪航力片对高+Gz应激大鼠心肌线粒体功能的影响.方法 72只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、应激对照组、高+Gz应激组、复方低剂量组、复方中剂量组和复方高剂量组,每组12只.各组大鼠均灌胃给药,给药体积为20ml/kg,1次/d,连续14d.其中,复方低、中、高剂量组分别按0.75、1.5和3.0g/kg给予天芪航力片制剂,空白对照组、应激对照组和高+Gz应激组给予等量生理盐水.第15天后4组大鼠进行离心机暴露(+10Gz,5min).观察各组大鼠心肌线粒体呼吸功能、抗氧化能力和ATP酶活性的变化.结果 与空白对照组和应激对照组相比,高+Gz应激组大鼠心肌线粒体Ⅲ态呼吸(ST3)和呼吸控制率(RCR)明显降低(P＜0.01),Ⅳ态呼吸(ST4)明显升高(P＜0.05),线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及Na+-K+-ATP酶活性也明显降低(P＜0.05或P＜0.01),而丙二醛(MDA)含量显著增加(p＜0.01).复方中药预处理可提高+10Gz暴露后大鼠线粒体ST3和RCR,增强线粒体抗氧化酶和ATP酶的活性,复方高剂量组大鼠心肌线粒体ST3、RCR和抗氧化酶、ATP酶活性显著高于高+Gz应激组(P＜0.05或P＜0.01),SOD活性甚至高于空白对照组(P＜0.05),而MDA含量则明显降低(p＜0.01).结论 复方中药天芪航力片可以改善高+Gz应激大鼠心肌线粒体呼吸功能,提高线粒体抗氧化能力和ATP酶的活性,对心肌线粒体损伤具有保护作用.
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出血性脑梗死大鼠脑组织含水量及Na+-K+-ATP酶活性变化
目的 研究比较大鼠脑梗死(MCAO)、出血性脑梗死(HI)模型脑组织含水量及Na+-K+-ATP酶活性的变化.方法 54只SD大鼠随机分为3组:假手术组、MCAO组和HI组.采用干-湿重法测定脑组织含水量,无机磷法测定Na+-K+-ATP酶活性.结果 HI组脑组织含水量在缺血6 h、MCAO组缺血12 h后较假手术组间差异均有统计学意义(P<0.01),缺血6 h 和12 h时MCAO组较HI组差异有统计学意义( P<0.05).MCAO组和HI组Na+-K+-ATP酶活性较假手术组间差异有统计学意义(P<0.01),缺血3～24 h时MCAO组较HI组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 Na+,K+-ATP酶活性降低及其引发的脑水肿可加重原有的脑梗死.
关键词： 脑梗死 脑水肿 Na+-K+交换ATP酶 -
D-α-生育酚调节蛋白激酶C活性对糖尿病视网膜病变的影响
目的探讨蛋白激酶C(PKC)在糖尿病视网膜病变(DR)中的作用和D-α-生育酚对糖尿病视网膜毛细血管组织病理的影响.方法实验大鼠分为4组:正常对照组(C组)、D-α-生育酚处理的正常对照组(T组)、糖尿病组(D组)、D-α-生育酚处理病鼠组(DT组).血糖、HbA1c和D-α-生育酚含量以及原位PKC、ATPase活性在处理后6个月被检测,毛细血管床形态立体定量评估DR.结果病程6个月时,D组大鼠深、浅层毛细血管呈现周细胞减少、基底膜增厚的特征性改变,成模6个月后糖尿病大鼠视网膜PKC活性显著增高＞100%,D-α-生育酚可阻止此升高.同一大鼠视网膜,D-α-生育酚也可阻止糖尿病诱导的Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力下降.D-α-生育酚可显著改善糖尿病视网膜微血管周、内皮细胞截面积和深浅层毛细血管基底膜厚度,而对血糖、HbA1c无影响.结论糖尿病诱导的组织病理异常可能大部分由PKC介导,D-α-生育酚可改善糖尿病视网膜毛细血管超微结构.
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失血性休克大鼠血管平滑肌细胞钙超载的三磷酸腺苷酶机制
目的探讨失血性休克大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙超载的三磷酸腺苷(ATP)酶机制. 方法雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组(C组)、休克开始组(S0组)、休克后2,4 h组(分别为S2和S4组),每组6只.以改良Wigger法,即股动脉插管放血并维持血压40 mm Hg 2 h建立失血性休克大鼠模型,观察休克后大鼠VSMC胞浆游离钙离子浓度及细胞膜、线粒体膜Ca2+-ATPase,Na+-K+-ATPase活性变化. 结果 C、S0、S2、S4组VSMC胞浆游离Ca2+浓度平均通道荧光对数值分别为2.03±0.15、2.37±0.32、2.55±0.46、2.80±0.43, 呈休克时间依赖性升高,S0组显著大于C组(P<0.05), S2、S4组非常显著地大于C组(P<0.01).细胞膜Ca2+-ATPase活性:C组为(36.0±7.2)μmol*mg-1*h-1;S0组[(35.3±8.5)μmol*mg-1*h-1]与C组比较,差异无显著性意义;S2、S4组分别为(26.5±6.9)、(24.3±4.7)μmol*mg-1*h-1,均显著低于C组(P<0.05和P<0.01);细胞膜Na+-K+-ATPase活性:C组为(34.0±5.8)μmol*mg-1*h-1;S0、S2组分别为(37.3±6.9)、(32.2±6.3)μmol*mg-1*h-1,与C组比较,差异无显著性意义;S4组为(27.0±4.9)μmol*mg-1*h-1,明显低于C组(P<0.05).线粒体膜Ca2+-ATPase活性:C组为(8.8±2.3)μmol*mg-1*h-1,S0、S2、S4组分别为(10.7±2.4)、(13.5±3.1)、(11.2±3.4)μmol*mg-1*h-1,均显著高于C组(P<0.05);线粒体膜Na+-K+-ATPase活性:C组为(5.3±1.1)μmol*mg-1*h-1 ;S0、S2组分别为(10.1±1.7)、(9.7±1.8)μmol*mg-1*h-1,非常显著地高于C组(P<0.01),S4组为(7.3±1.2)μmol*mg-1*h-1,显著高于C组(P<0.05). 结论休克后VSMC出现钙超载,其机制可能与休克后VSMC细胞膜Ca2+-ATPase、Na+-K+ -ATPase活性下降以及线粒体膜Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性升高有关.
关键词： 休克 失血性 Ca2+转运ATP酶 Na+-K+交换ATP酶 血管平滑肌细胞 钙超载
