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Beta-TC-6细胞的免疫组化及分子生物学属性分析
目的 探讨Beta-TC-6细胞免疫组化及分子生物学基本属性及基本鉴定指标.方法 (1)用针对小鼠细胞种属特异且敏感的c ox-Ⅰ基因引物,以Beta-TC-6细胞的基因组DNA为模板行PCR及后续琼脂糖凝胶电泳;(2)将Beta-TC-6细胞制备成细胞蜡块,用免疫组化S-P法检测细胞蜡块胰岛素标记物(INS)和神经内分泌细胞特异性分子标记物突触素(Syn)、嗜铬素(CgA)及神经特异性烯醇化酶(NSE)的表达,并检测细胞增殖指标Ki67和P53.(3)用计算机图像分析技术测试活细胞面积及细胞蜡块中细胞的大小.结果 (l)cox-Ⅰ基因引物经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后在目的泳道上得到单一目的条带;(2)免疫组化检测:INS、Syn、CgA、Ki67及P53均表达阳性,Ki67的阳性指数为99％,NSE表达呈阴性;(3)体外培养状态下活细胞的面积均值为696.59 μm2,细胞蜡块切片中细胞及核的面积分别为60.54 μm2、32.17μm2,核浆比1.32.结论 cox-Ⅰ基因引物PCR扩增并联合免疫组化检测指标INS、Syn、CgA、Ki67及P53可对Beta-TC-6细胞属性进行甄别.
