首页 > 文献资料
-
次声刺激诱导原代培养大鼠星形胶质细胞释放谷氨酸的研究
目的:观察16Hz,130dB次声刺激对原代培养的大鼠星形胶质细胞谷氨酸释放的影响,并探讨其释放机制.方法:原代培养大鼠海马区星形胶质细胞,将其分为次声刺激组(IE group,n=6),Gap26+次声刺激组(Gap26+IEgroup),对照组(Ctrl group,n=6).次声刺激组细胞暴露于次声舱中,分别给予15min,30min,60min,90min,120min和240min的次声刺激;对于Gap26+IE组,则在次声刺激前,选用Cx43半通道阻断剂Gap26预处理星形胶质细胞;对照组也置于次声舱,但不给予次声刺激.次声刺激频率为16Hz,强度为130dB.为了排除Gap26对谷氨酸释放的影响,还选用乱序Gap26肽段(Scrb Gap26)来预处理星形胶质细胞(Scrb Gap26+IE group,n=6).采用免疫荧光染色测定细胞Cx43的表达情况,采用高效液相色谱(HPLC)来测定细胞外液谷氨酸浓度.结果:次声刺激后,IE组细胞外液谷氨酸的浓度显著升高,并在刺激90min后,细胞外液谷氨酸浓度达峰值,为(4.6±0.3)nmol/ml,显著高于对照组(2.3±0.2)nmol/ml (P＜0.05),这说明次声刺激可以显著增高星形胶质细胞外液的谷氨酸含量.此外,次声刺激后,IE组细胞Cx43的表达也显著升高,刺激60mins时,Cx43平均荧光强度达到峰值,为(198±33)(AUC),显著高于对照组(P＜0.05).而对于Gap26+IE组,次声刺激后细胞外液谷氨酸浓度的升高受到抑制,90min后,细胞外液谷氨酸浓度为(3.58±0.17)nmol/ml,显著低于次声刺激组(P＜0.05).结论:次声刺激可以诱导星形胶质细胞释放谷氨酸;Cx43半通道阻断剂Gap26抑制了谷氨酸释放,次声刺激诱导的谷氨酸释放可能是通过Cx43半通道来完成的.
-
调神通络针刺法对缺血再灌注大鼠海马区神经元形态及Cx43半通道影响的实验研究
目的:探讨调神通络针刺法对缺血再灌注大鼠海马区神经元形态的影响及对Cx43半通道的相关作用机制.方法:以经脑缺血再灌注处理的健康雄性Wistar大鼠为研究对象,分为正常组、假手术组、模型组、针刺组、非穴位针刺组,以针刺治疗为干预手段,采用细胞HE染色法镜下观察大鼠海马区的神经元形态结构及病理改变;用荧光定量PCR检测大鼠海马区Cx43、mGluR5、P38MAPK mRNA含量表达.结果:正常组与假手术组Cx43、mGluR5、P38MAPK mRNA含量及神经细胞形态结构无差异;模型组Cx43、mGluR5、P38MAPK mRNA含量明显高于正常组(P＜0.05),神经细胞损伤明显,提示造模成功;针刺组Cx43、mGluR5、P38MAPK mRNA含量较模型组低(P＜0.05),病理改变与正常组相同;非穴位针刺组Cx43、mGluR5、P38MAPK mRNA含量及病理改变与模型组无差异.结论:调神通络针刺法能够有效抑制Cx43、mGluR5、P38MAPK mRNA的表达,调控Cx43磷酸化和去磷酸化过程,进而调节Cx43半通道的通透性,使该通道起到佳的脑保护作用,抑制神经细胞进一步损伤,并促进已损伤神经的恢复.
