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左旋四氢巴马汀在脑动脉内皮细胞缺氧复氧时对一氧化氮合酶Ⅲ mRNA表达的影响
目的探讨左旋四氢巴马汀(L-THP)在缺氧与复氧时对原代培养的猪脑动脉内皮细胞(CAEC)一氧化氮合酶Ⅲ(NOSⅢ)mRNA表达的影响.方法将原代培养的猪脑动脉内皮细胞进行缺氧与复氧实验,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测定缺氧、复氧、以及L-THP干预时NOSⅢ mRNA表达的变化.结果 (1)缺氧1h,NOSⅢ mRNA表达上调(P＜0.01),复氧2、6、12h NOSⅢ mRNA表达低于正常,6h低(P＜0.01),复氧24h其表达恢复正常;(2)加入不同浓度的L-THP(10-8～10-3mol.L-1)缺氧1h,NOSⅢ mRNA表达较缺氧组下调以10-5mol*L-1浓度作用显著(P＜0.05),接近正常对照组(P＜0.05);(3)加入不同浓度的L-THP(10-8～10-3mol*L-1)复氧6h,NOSⅢ mRNA表达明显高于缺氧复氧6h组,10-5mol*L-1浓度作用显著(P＜0.01),接近正常对照组(P＞0.05).结论在脑动脉内皮细胞缺氧时L-THP抑制NOSⅢ mRNA表达的上调; 在复氧时抑制NOSⅢ mRNA表达的下调,从而调节NO的生成.
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缺氧与复氧对脑动脉内皮细胞一氧化氮合酶Ⅲ表达的影响
目的:用原代培养的脑动脉内皮细胞(CAEC)进行缺氧、复氧,观察一氧化氮合酶Ⅲ(NOSⅢ)基因表达的变化,探讨缺氧、复氧影响NO生成的分子机制.方法:将原代培养的CAEC进行缺氧1 h,复氧2、6、12和24 h,用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)和免疫细胞化学方法检测NOSⅢmRNA和蛋白质表达的变化.结果:①CAEC缺氧1 h,NOSⅢmRNA和蛋白质表达明显高于正常对照组;②缺氧1 h后复氧2、6和12 h,NOSⅢ mRNA和蛋白质表达下调,其中复氧6 h,其表达降至低,24 h后表达恢复至正常.结论:缺氧引起脑动脉内皮细胞NOS Ⅲ基因表达上调,而复氧使其表达明显下调.
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超氧化物歧化酶对脑动脉内皮细胞缺氧复氧时一氧化氮合酶Ⅲ表达的影响
目的探讨在脑动脉内皮细胞缺氧复氧时超氧化物歧化酶对一氧化氮合酶Ⅲ(NOSⅢ)mRNA及蛋白表达的影响.方法将原代培养的猪脑动脉内皮细胞(CAEC)进行缺氧复氧,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法(ABC法)分别测定缺氧、复氧以及超氧化物歧化酶(SOD)干预时,NOSⅢ mRNA及蛋白质表达的变化.结果①缺氧1 h,NOSⅢ mRNA、蛋白质的表达增加,分别是正常对照组的1.32、1.29倍,加用SOD干预后,不能抑制其表达的上调;②复氧2、6、12 h,NOSⅢ mRNA、蛋白的表达低于正常对照组,6 h降至低,是正常对照组的0.61、0.69倍.用不同浓度的SOD(100～400 U/mL)预处理内皮细胞缺氧1 h后复氧6 h,SOD能抑制NOSⅢ mRNA、蛋白表达的下调,并且呈剂量依赖性.结论在内皮细胞复氧时SOD能抑制NOSⅢ基因表达的下调,缺氧时SOD不能抑制NOSⅢ基因表达的上调;氧自由基可能参与了复氧时NOSⅢ基因表达的下调.
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中国人群中一氧化氮合酶Ⅲ基因多态性与阿尔茨海默病的关联性研究
目的:研究中国人群中一氧化氮合酶Ⅲ(NOS-Ⅲ)298 G/T多态性与阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发病的相关性;方法:通过实时定量荧光PCR和GeneAmp 5700 SDS软件检测530例AD患者和601例非痴呆对照者NOS-Ⅲ298 G/T的基因多态性,并应用Logistic回归模型分析其与AD发病的相关性;结果:NOS-Ⅲ的G/G、G/T和T/T在AD组和对照组中分布差异无统计学意义(P＞0.05),没有发现NOS-Ⅲ298 G/T基因多态性与AD发病存在关联性;调整年龄和性别的影响后,G/G基因型并不是AD发病的危险因素,其OR值分别为1.17,P=0.73.结论:在中国人群中NOS-Ⅲ298 G/T基因多态性与AD的发病不存在关联性.
