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内皮型一氧化氮合酸文献资料
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胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及机制
目的 探讨胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及相关机制.方法 体外常规培养内皮细胞系ECV304,随机分为正常对照组(n=6),体积分数15%(V/V)正常大鼠血清培养;烧伤血清刺激组(n=6),体积分数15%(V/V)自制烧伤大鼠血清培养,血清采自背部30%TBsAIII 烫伤大鼠模型;胰岛素处理组(n=6),体积分数15%(V/V)自制烧伤大鼠血清中加入10-7M/L胰岛素培养;刺激6 h后采用原位末端标记法(TUNEL)观察内皮细胞凋亡、免疫组织化学染色和蛋白印迹法枪测抗凋亡蛋白bcl-2及eNOS的蛋白表达变化,数据以表示,均数比较采用单凶素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 与正常对照组比较,烧伤血清促进内皮细胞捌亡(18.5%±3.1%),免疫组化染色bcl-2平均吸光度低(0.14±0.02),蛋白印迹实验显示bel-2(0.36 4±0.12)和p-eNOS(0.55±0.28)表达降低(P<0.01).相对十烧伤血清刺激组,胰岛素处理组细胞凋亡显著减少(9.6 4±2.8%),免疫组化染色bcl-2平均吸光度升高(0.21±0.03),蛋白印迹实验显示bcl.2(0.94 4-0.25)和p-eNOS(0.89±0.16)表达明显恢复(P<0.01).eNOS在各组中无明显变化.结论 胰岛素明显抑制烧伤血清诱导下的内皮细胞凋亡并增加扰凋亡蛋白bcl-2的表达,此作用町能与eNOS的磷酸化有关.
