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杭州地区耐甲氧西林表皮葡萄球菌对利奈唑胺耐药机制研究
目的：了解杭州地区耐甲氧西林表皮葡萄球菌( MRSE)临床菌株对利奈唑胺耐药机制。方法2013年5月—2015年4月从杭州地区多家医院败血症、泌尿道感染、感染性胸膜炎患者标本中分离出23株对利奈唑胺耐药表皮葡萄球菌( LRSE )。采用 E-test测定13种抗生素对上述LRSE菌株的低抑菌浓度( MIC)。采用脉冲场凝胶电泳( PFGE)和聚类分析确定上述LRSE菌株的同源性。采用PCR及其产物测序了解上述LRSE菌株23S rRNA 基因第5功能区G2576T突变和cfr基因与利奈唑胺耐药的关系。结果23株LRSE中,15株利奈唑胺MIC>256μg/ml,8株利奈唑胺MIC分别为6或8μg/ml,但均对苯唑西林和头孢西丁耐药。利奈唑胺高耐药( MIC>256μg/ml) LRSE菌株中,LRSE1和LRSE2、LRSE3~LRSE6、LRSE9~LRSE12分别为来自同一医院的同一克隆系。所有LRSE菌株均携带cfr基因,但利奈唑胺高耐药( MIC>256μg/ml)的15株LRSE菌株同时存在23S rRNA基因第5功能区G2576T突变,但利奈唑胺低耐药( MIC=6或8μg/ml)的8株LRSE菌株则否。结论本地区分离的LRSE菌株对利奈唑胺耐药水平差异较大,但分布较广且均为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌。 LRSE对利奈唑胺耐药性与其23S rRNA基因第5功能区G2576T突变和携带cfr基因有关。
关键词： 表皮葡萄球菌 利奈唑胺 耐药 23S rRNA基因 cfr基因 -
肺炎支原体23S rRNA基因测序分析的临床应用价值
目的:探讨儿童呼吸道肺炎支原体(MP) 23S rRNA基因测序分析的临床应用价值.方法:收集MP荧光定量PCR≥1×104拷贝数的痰或咽拭子样本,行23S rRNA基因V区测序,并按测序结果将患儿分为突变组和未突变组,比较两组患儿的临床资料;将相同样本行体外培养加药敏实验,与测序进行比较.结果:共收集120例样本,98例23S rRNA基因发生2063位点A-＞G突变(突变组),22例未检测到突变(未突变组).两组患儿在性别、年龄、急性期外周血白细胞等一般资料无显著差异,但住院时间、总发热时间、大环内酯类药物治疗后退热时间、咳嗽时间及疗程方面存在统计学差异,且突变组患儿肺外并发症及大叶性肺炎实变率高于未突变组(P＜0.05).120例样本中48例MP体外培养阳性(阳性率40％),其中20例检出大环内酯类耐药,耐药率为16.67％,显著低于23S rRNA基因突变率(P＜0.05).结论:MP 23S rRNA基因突变率较高.突变组临床症状重、疗程长、并发症多,提示基因突变与MP耐药存在相关性.相对于基因测序,体外培养加药敏实验阳性率及耐药率较低.MP 23S rRNA基因测序可作为耐药检测的手段,具有一定的临床价值.
关键词： 肺炎支原体 23S rRNA基因 测序 耐药性 -
23S rRNA基因在临床诊断细菌性感染中的应用
细菌23S rRNA存在于细菌核糖体大亚基中,几乎为所有细菌所共有,其编码的基因具有保守性和变异性.本文就23S rRNA基因的分子结构和特征,在临床诊断细菌性感染中的应用,以及进一步分析其PCR产物的分子生物学方法等研究进展作了综述.
关键词： 23S rRNA基因 细菌性感染 诊断 分子生物学方法 -
吉林地区儿童肺炎支原体耐药状况检测分析
目的 了解吉林地区支原体肺炎患儿耐大环内酯类抗菌药物状况及探讨可能存在的耐药机制.方法 收集来本院就诊的1 272例0岁～15岁急性呼吸道感染患儿的咽拭子标本.进行支原体快速培养与药敏试验;抽取耐红霉素的支原体培养液100例提取DNA,进行16S rRNA基因PCR扩增;抽取16S rRNA基因PCR扩增阳性标本30例进行23S rRNA基因PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳、回收目的片段测序,测序结果与GenBank已登录的肺炎支原体标准株(M129) 23S rRNA基因进行比对.观察其有无耐药基因位点的突变.结果 吉林地区呼吸道感染的患儿肺炎支原体快速鉴定培养阳性率为35.30％;肺炎支原体耐药率高的是红霉素(61.1％);耐药肺炎支原体19株的分子机制均为23S rRNA结构域V区2063位点A-G的突变.结论 首次证明吉林地区耐药肺炎支原体的分子机制为23S rRNA结构域V区2063位点A-G的突变.
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肺炎支原体23S rRNA基因突变与婴幼儿肺炎支原体肺炎临床相关性研究
目的 探讨肺炎支原体23S rRNA基因突变与婴幼儿肺炎支原体肺炎的临床相关性,从而提高临床诊疗能力.方法 选取确诊为肺炎支原体肺炎的婴幼儿115例,根据肺炎支原体23S rRNA结构域V区是否发生点突变将患儿分为大环内酯类耐药组和大环内酯类敏感组,分析比较2组患儿临床特征及实验室结果.结果 115例患儿的肺炎支原体IgM抗体阳性率为51.30％,肺炎支原体DNA阳性率为100％;93例肺炎支原体23S rRNA结构域V区发生A2063G点突变,22例未发生突变,大环内酯类耐药率为80.87％;大环内酯类耐药组患儿的总热程、住院时间、C-反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)均高于大环内酯类敏感组患儿,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 大环内酯类耐药肺炎支原体所致的婴幼儿肺炎支原体肺炎病程相对较长,需引起临床医生的重视,CRP、LDH升高有助于预测大环内酯类耐药肺炎支原体感染.
关键词： 大环内酯类耐药肺炎支原体 肺炎支原体肺炎 23S rRNA基因 婴幼儿
