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急性淋巴细胞白血病患者免疫功能评价初步研究
本研究旨在采用蛋白质芯片及酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的IL-2、IL-4、IL-12、IL-13、TNF-α、IFN-γ 6种免疫相关细胞因子进行测定,以评价患者的免疫功能.制作人细胞因子蛋白质芯片,通过芯片及ELISA法对收集的患者及正常人外周血的血清(其中患者28例,正常对照25例)进行测定.结果表明,ALL患者IL-4、IL-13、IL-12、IFN-γ及TNF-α表达水平均低于正常组,但ELISA检测显示,TNF-α表达在ALL和正常对照组中均为阴性.结论:ALL患者的细胞免疫与体液免疫均受到抑制,芯片比ELISA方法敏感.
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应用SELDI-TOF-MS技术建立直肠癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型
目的:建立直肠癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型并初步验证.方法:用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得新发直肠癌、直肠息肉患者和正常人血清的蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,建立直肠癌的筛选模型,并对其进行了盲法验证.结果:直肠癌组与对照组共有26个蛋白质有显著性差异(P＜0.05);以其中4个蛋白质生物标志物(质/荷比9295,3 730,3 938和4 095)组建的筛选模型检测正确率为96.8%(93/96),经盲法验证,其灵敏度为95.0%(38/40),特异性为93.4%(45/48).结论:建立的血清蛋白质指纹图谱模型能够区分直肠癌与非直肠癌患者,SELDI-TOF-MS在直肠癌的诊断及肿瘤特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面具有一定价值.
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蛋白质芯片筛选儿童急性淋巴细胞白血病血清标志蛋白质的临床研究
目的 利用蛋白质芯片和生物信息学方法从急性淋巴细胞白血病(ALL)息儿血清中筛选标志蛋白质,为临床提供分子诊断学方法.方法 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术和弱阳离子交换(WCX2)蛋白质芯片对44例ALL初诊患儿血清和35例健康儿童血清的蛋白质谱图进行检测,使用PBSII-C型蛋白质芯片阅读机读取数据,获得的结果采用Ciphergen公司的Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析.结果 ALL初诊患儿与正常儿童血清蛋白质谱相比有7个显著差异蛋白质(P＜0.00001),其中3个蛋白质在患儿血清中高表达,4个蛋白质低表达.Biomarker Patterns system软件用上述标志分子建立儿童ALL诊断的分类树模型,检测灵敏度为88.6%(39/44).特异性为82.9%(29/35).结论 实验证明利用蛋白质组学和生物信息学方法可以从血清中筛选出儿童ALL相关的标志蛋白质.而且蛋白质芯片技术对于发现和筛选血清中的ALL标志蛋白质是一种有效、快速的工具.
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飞行质谱法与肌钙蛋白Ⅰ快速检测法对急性心肌梗死早期诊断的比较
目的比较飞行质谱法、肌钙蛋白Ⅰ(TnI)快速检测法在早期急性心肌梗死(AMI)诊断中的作用.方法 选择胸痛发作2 h之内的早期AMI(A1组)患者45例,正常对照组45例.利用飞行质谱法测定所有血清,利用TnI快速检测法测定AMI患者的血清.再将病历齐全的同时用飞行质谱法和TnI快速检测法测定的患者进行比较.结果①A1组患者与正常人之间质荷比为8149.84和5910.00.这两种蛋白质的差异呈显著性.A1组患者在质荷比8149.84的蛋白质呈低表达;而在质荷比5910.00的蛋白质呈明显高表达,可作为诊断早期AMI的血清标志物.②飞行质谱法的敏感性是000000E-M8,特异性是0.008,飞行质谱法对早期AMI的诊断的敏感性和特异性都明显优于TnI快速检测法.结论飞行质谱方法灵敏度和特异性高,可快速、准确诊断早期AMI,优于TnI快速检测法.
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饮食诱导肥胖与肥胖抵抗大鼠血清差异蛋白筛选
目的:探讨高脂饲料诱导的肥胖(diet-induced obesity,DIO)与肥胖抵抗(diet-induced obesity resistance,DIO-R)大鼠不同易感性的差异及血清中蛋白表达.方法:健康雄性SD大鼠40只,随机分为基础组和高脂饲料组,分别给予基础饲料和高脂饲料5w后,参照Levin等的方法建立动物模型,按照体重增加量排序,位于体重上1/3的大鼠筛选为肥胖大鼠,位于体重下1/3的大鼠筛选为肥胖抵抗大鼠.处死动物,收集血清样品检测各组相关指标的差异,并应用SELDI蛋白质芯片技术检测DIO与DIO-R大鼠血清蛋白的差异表达.结果:DIO大鼠体重﹑体脂比﹑血糖﹑血脂均与DIO-R大鼠有显著性差异.由蛋白质芯片检测图可见,在分子量2～100 ku范围内,分子量为7 945和9 513的蛋白峰在DIO大鼠和DIO-R大鼠血清中存在差异;分子量为6256、6267、4496的蛋白峰在DIO-R大鼠和基础组大鼠血清中存在差异.结论:SD大鼠对高脂饮食诱导的DIO和DIO-R存在易感性差异,应用SELDI蛋白质芯片技术筛选出了DIO大鼠与DIO-R大鼠血清差异蛋白,为以后进行蛋白质分离﹑纯化及鉴定提供依据.
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利用飞行质谱法对急性心肌梗死血清标志物的研究
目的利用飞行质谱法测定的蛋白质谱改变来研究诊断急性心肌梗死(AMI)的血清标志物.方法 AMI病人85例,不同时段血清120份,不稳定型心绞痛病人(UP)21例,正常对照组45例.分别将所有AMI病人血清与正常对照组比较,早期AMI病人(A1)45例与正常组比较,A1组病人与UP病人比较.利用飞行质谱法测定所有血清.结果①AMI病人与正常人之间在质荷比(M/Z)8 130.44、8 149.84、6 637.82、7 928.85、3 299.88、4 307.55这六种蛋白质的差异呈显著性.尤其质荷比8 130.44的蛋白质AMI病人呈明显低表达,可作为诊断AMI的血清标志物.②～组病人与正常人之间在质荷比8 149.84和5 910.00这两种蛋白质的差异呈显著性.A1组病人在质荷比8149.84的蛋白质呈低表达,而在质荷比5 910.00的蛋白质呈明显高表达,可作为诊断早期AMI的血清标志物.③A1组病人与UP病人之间在质荷比1 734.36的蛋白质差异呈显著性.A1组病人在质荷比1734.36的蛋白质呈低表达,可作为鉴别诊断早期AMI和UP的血清标志物.结论飞行质谱方法灵敏度和特异性高,可快速、准确诊断出早期AMI,优于TnT.
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蛋白质芯片技术在肿瘤标志物筛选及鉴定中的应用
蛋白质芯片技术具有快速、并行、自动化和高通量等特点,能同时对全基因组水平上千种蛋白质进行分析,是蛋白质组学研究的重要手段.
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蛋白质芯片技术在肿瘤检测中的应用
随着人类基因组全序列草图的完成,从基因水平向蛋白质水平深化已成为生命科学研究的迫切需要和新的任务.蛋白质芯片技术的建立为研究蛋白质水平的生命活动开辟了更为广阔的前景,提供了新型有效的研究手段.从蛋白质整体水平上研究肿瘤的发生与转移,寻找与肿瘤发生及转移相关的新的蛋白质、肿瘤特异性的标志物及肿瘤药物治疗的靶标,对肿瘤的诊治将起到重要作用.本文对蛋白质芯片技术在肿瘤检测中应用的新进展作一综述.
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应用蛋白质芯片技术筛选直肠癌患者
目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)从直肠癌患者血清中筛选标志蛋白,找出佳的标志蛋白组合模式作为临床诊断指标.方法 采用WCX2芯片及SELDI-TOF-MS技术对98例直肠癌患者及40例对照组血清进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析.结果 直肠癌组与对照组共有26个蛋白质差异有显著性(P＜0.05);以其中4个蛋白质生物标志物(质/荷比9295、3730、3938和4095)组建筛选模型,经盲法验证,其敏感度为95.0%(57/60),特异性为93.4%(45/48);CEA敏感度为68.3%(41/60),特异性为77.1%(37/48);CA199敏感度为58.3%(35/60),特异性为75%(36/48).结论 SELDI-TOF-MS技术的敏感度和特异性远远高于目前所采用的某一单独的标志物的血清学诊断,其结果对进一步研究直肠癌的蛋白质组学改变及其临床应用可能具有重要意义.
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SELDI蛋白质芯片技术在医学中的应用现状
随着全球基因组计划的推进,人类基因组工作草图得以公布,标志人类染色体总DNA有32亿碱基对,包含有大约3万个基因,远远少于原来约10万个基因的估计[1].据报道,人类结构与功能各异的蛋白质有10万余种,与功能基因(3万～4万个)相比显然表现了更强的多样性和可变性,以及它们在产生和代谢方面受到多因素调节和相互之间的作用更是构成了一个复杂多变的体系.
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蛋白质芯片技术及其在食品致病菌检测中的应用
目的:使蛋白质芯片技术应用于食品致病菌的检测.方法:讨论了应用于食品致病菌检测的蛋白质芯片技术,比较了检测致病微生物的常用方法及其优缺点.结果:能够制作出满足食品致病菌检测的速度快、准确性高、通量大等发展趋势的蛋白质芯片.结论:蛋白质芯片技术应用于食品致病菌检测有独特优势,定会在此领域获得广泛应用.
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蛋白质芯片技术及其在食品检测中的应用
生物芯片是21世纪一项革命性的技术,包括基因芯片、蛋白芯片及芯片实验室3个领域[1],其中蛋白质芯片是一种高通量、高灵敏度、高特异性且微型化的蛋白质分析技术[2].有关试验表明,该技术对多种疾病的早期诊断均有一定的作用[3].
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应用蛋白质芯片筛选壮族单纯性室间隔缺损血清标志蛋白
目的:应用蛋白质芯片技术筛选壮族单纯性室间隔缺损(VSD)血清标志蛋白.方法:用表面增强激光解吸、电离飞行时间质谱技术和CM10芯片检测25例壮族单纯性VSD患儿与36例儿科常见病患儿血清,用Ciphergen公司的Biomark Wizard软件分析数据.结果:有12个蛋白具有统计学差异,其中质荷比(m/z)6 640.784、8570.154、8698.278、2244.582、5321.868、6441.972和7973.310 7个蛋白在VSD患儿血清高表达,质荷比(m/z)2 213.579、4604.572、2142.465、9198.582和2169.264 5个蛋白下调.结论:蛋白质芯片技术是发现与筛选室间隔缺损血清标志蛋白的快速、有效的蛋白质组学工具.
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生物芯片技术在医学检验中的应用进展
现代医学检验技术正朝着标准化、智能化、集约化的方向发展,生物芯片技术是这一趋势的引领者,它是一种通过微加工技术和微电子技术将大量生物大分子如核酸片段、多肽分子、抗原、抗体等物样品有序地固化于玻片、硅片、玻璃片、塑料片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等固相介质表面,组成密集二维分子排列,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效检测分析的技术.
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蛋白质芯片技术检测血清室间隔缺损特异标志物的研究
目的 应用蛋白质芯片技术筛选单纯性室间隔缺损血清特异标志物.方法 采用病例对照设计,用CM10蛋白质芯片检测56例单纯性室间隔缺损患儿与85例儿科常见病患儿血清,筛选血清差异蛋白.结果 有21个蛋白具有统计学差异,其中质荷比6640.784、8571.079、6441.972、8698.804、3322.549、2128.960、2291.255、2055.652、2243.846和2.99.661等10个蛋白在VSD患儿血清中呈高表达,而质荷比2050.946、9306.537、7783.535、9198.666、2143.745、4604.572、7993.109、2824.602、2230.218、2083.311和9360.675等11个蛋白下调.结论 蛋白质芯片技术是进行室间隔缺损分子流行病学研究的有效工具,所筛选出的蛋白成分可能是单纯性室间隔缺损的血清标志物.
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SELDI-TOF-MS技术筛选鼻咽癌患者血清标志蛋白
目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选鼻咽癌(NPC)患者血清中的标志蛋白.方法 用Ciphergen Biosystem公司生产的PBSⅡ/C型蛋白质指纹图谱仪和GoldChip(金芯片)蛋白芯片检测98例鼻咽癌患者和30例正常人血清的蛋白指纹图谱,采用Biomaker Wizard 3.1软件分析两组的蛋白表达情况筛选差异表达蛋白.结果 两组均检出较多蛋白峰,并且有表达明显的蛋白峰(P<0.01),在鼻咽癌患者中,低表达的有1个(即m/z为5 026Da),高表达的有4个(即m/z为5 934 Da,5 352 Da,6 655 Da,6 675 Da).结论 用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术筛选NPC患者血清中特异性蛋白标志物对鼻咽癌的早期诊断具有较大价值.
关键词： 鼻咽癌 SELDI-TOF-MS 蛋白质芯片技术 -
蛋白质芯片技术检测肿瘤标志物及临床应用
目的:探究蛋白质芯片技术在检测肿瘤标志物中的临床治疗效果.方法:采用蛋白质芯片技术和肿瘤标志物检测40例肺癌、20例肝癌和,25例胃癌、28例直肠癌和170例良性患者,对其研究结果进行比较和分析.结果:13例肿瘤患者肺癌的阳性率为75％,肝癌患者的阳性率为100％,胃癌患者的阳性率为80％,直肠癌患者阳性率为78.6％.113例肿瘤患者的阳性人数为81例,阳性率为71.68％,阴性人数为32例,阴性率为28.32％,170例非肿瘤患者阳性人数为5例,阳性率为2.9％,阴性人数为165例,阴性率为97.06％,两者相比,差异显著,有统计学意义(P<0.05).结论:采用蛋白质芯片在检测肿瘤标志物有较高的灵敏度、阳性率和特异性,值得在临床实践中推广应用.
