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  • Pir-b基因慢病毒载体的构建和表达

    作者:罗毅;王小聪;邹萍

    本研究构建pir-b基因慢病毒载体并检测其在293T细胞中的表达.从小鼠的mRNA中钓取pir-b基因的开放阅读框,与测序载体连接,经过测序鉴定以后,构建含有pir-b基因的慢病毒穿梭质粒,与包装质粒一起共转染293T细胞,收获上清病毒浓缩纯化后转染293T细胞,用Western blot检测PIR-B蛋白的表达,同时以含有egfp基因的慢病毒作为转染效率的对照.结果表明:含有pir-b开放阅读框的慢病毒穿梭质粒构建成功,序列测定的结果与预期完全一致.含有pir-b的慢病毒载体包装成功.Western blot的结果证实外源PIB-B蛋白在293T细胞中正常表达.结论:本研究成功构建了含有pir-b基因的慢病毒载体,转染293T细胞以后正常表达PIR-B蛋白,这为以后深入研究pir-b在免疫调节中的作用奠定了坚实的基础,

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