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三七皂苷对造血细胞AP-1家族转录调控蛋白NF-E2,c-jun和c-fos的诱导作用
为了进一步研究三七总皂苷(PNS)对转录调控蛋白AP-1家族的主要成员NF-E2、c-jun和c-fos转录因子的诱导作用,探讨PNS在造血细胞内的信号传递途径,选用人粒系HL-60、红系K562、巨核系CHRF-288和Meg-014个细胞株作靶细胞,经PNS刺激处理后提取细胞核蛋白,分别用人抗NF-E2、c-jun和c-fos抗体与核蛋白作Western blot杂交试验,并用32P标记的具有与NF-E2、c-jun和c-foss转录因子共同结合位点的AP-1双链寡核苷酸探针作电泳带移动阻滞试验(EMSA).结果表明:①Westem blot显示PNS诱导HL-60,K562,CHRF-288和Meg-01 4株细胞的NF-E2和c-jun转录因子蛋白水平分别是未经处理细胞的1.5-2.5倍和2.0-3.0倍.诱导的c-fos蛋白在K562,CHRF-288和Meg-01 3株细胞分别提高2.0-3.0倍,但HL-60细胞的c-fos在PNS处理后无明显变化;②EMSA显示AP-1转录调控蛋白与DNA结合复合物的特异性条带,经PNS诱导后4株细胞的AP-1蛋白与DNA复合物条带密度明显高于未经处理的细胞.结论:PNS在造血细胞内对基因的转录调控涉及到AP-1家族转录因子成员NF-E2、c-jun和c-fos,通过诱导这些转录因子量的增加,与特异性DNA促进子结合的活性增高而调控与细胞增殖分化相关的基因的表达.
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Nrf2/Keap1通路抗癌作用的研究进展
转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)和它的胞质接头蛋白Keap1是细胞抗氧化反应的中枢调节者,Nrf2通过与抗氧化反应原件(ARE)相互作用,调节编码抗氧化蛋白和Ⅱ相解毒酶的表达.Nrf2-Keap1/ARE通路在抗肿瘤,抗凋亡,抗炎等方面发挥着重要的作用.本文综述了Nrf2-Keap1/ARE通路在抗癌作用方面的新研究.
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氨磷汀对人巨核细胞白血病Dami细胞促分化作用的机制研究
目的：探索氨磷汀对人巨核细胞白血病Dami细胞的促分化作用的机制。方法：采用氨磷汀1 mmol·L-1刺激人巨核细胞白血病Dami细胞系，共诱导12 d，利用RT-PCR及Western blot方法检测在诱导的0、4 d、8 d、12 d时巨核细胞分化相关转录因子GATA-1、NF-E2的表达变化，并通过对Dami细胞进行核质分离以及利用免疫荧光的方法研究两种转录因子在核质中的分布。结果：RT-PCR及Western blot没有检测到巨核细胞分化相关转录因子GATA-1和NF-E2表达水平升高，但入核实验结果表明转录因子NF-E2、GATA-1入核活性增加。结论：氨磷汀诱导Dami细胞向成熟巨核细胞分化是通过增加转录因子NF-E2、GATA-1入核活性而发挥作用。
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NF-E2对红系造血相关基因表达的影响
目的 探讨红系特异性转录因子NF-E2对红系造血相关基因表达的影响.方法 应用基因芯片方法检测转染p45NF-E2基因后红白血病细胞株HB22.2中基因表达的变化;通过改变培养条件诱导红白血病细胞株HB60-5向成熟细胞分化,检测诱导分化过程中NF-E2等红系造血相关基因表达变化.结果 p45NF-E2缺陷细胞HB22.2转染外源p45NF-E2后,血红蛋白基因及Gata-1、EDRF基因表达上调,Fli基因表达下调;HB60-5向成熟细胞分化过程中,随着p45NF-E2的表达上调,同样出现Gata-1和EDRF表达增强,Fli表达减弱.结论 NF-E2能对多种红系相关基因表达调控.从而促进红系分化.
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模拟微重力对巨核细胞增殖和分化的影响
目的：探讨模拟微重力对巨核细胞增殖和分化的影响及机制。方法：利用RCCS-4模拟微重力，采用台盼蓝染色判断细胞活力，细胞计数及 CCK8法评估细胞增殖情况，采用流式细胞术检测 CD41＋/CD61＋细胞比例和细胞周期。 RT-PCR 法检测血小板生成素受体（c-mpl）和相关转录因子mRNA 表达水平。结果：培养24、48、72 h 后，SMG组细胞计数、CCK8法细胞增殖活性、G2/M期细胞比例、c-mpl mRNA 表达水平均显著低于 NG 组（P ＜0．05）；培养48、72 h 后 SMG 组 CD41＋/CD61＋细胞比例、Rant 相关转录因子1（RUNX-1） mRNA表达水平显著低于NG组（P＜0．05）。结论：模拟微重力抑制体外培养巨核细胞增殖和分化，转录受抑导致c-mpl 表达下调进而c-mpl介导的下游通路受抑可能是相关机制。
