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猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗诱导仔猪保护力及其免疫机制研究
目的 构建猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗,研究该疫苗诱导仔猪产生的保护力及其免疫机制. 方法 以猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗1×1011 CFU灌胃免疫40日龄健康仔猪,同时设空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组,每组4头.每两周免疫1次,共免疫2次.于末次免疫后4周,用猪带绦虫卵进行攻击感染,攻击感染后3个月解剖猪体,摘取囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC).酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况. 结果 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗免疫仔猪获得71.36％的保护力;与空载体对照组和MRS对照组比较,血清IgG和IgG2a水平显著升高(F=95.055、650.293,P＜0.05),IgG1水平显著降低(F=78.422,P＜0.05);加抗原刺激时,PBMC增殖水平显著升高(F=107.019,P＜0.05);PBMC培养上清液中IL-2和IFN-γ水平显著升高(F=229.668、2251.690,P＜0.05),IL-4和IL-10水平显著降低(F=274.832、1168.768,P＜0.05). 结论 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用.
关键词： 猪带绦虫 重组Bb-TSO45W-4B疫苗 保护力 免疫机制 仔猪 -
猪带绦虫混合重组双歧杆菌疫苗诱导仔猪的保护效果研究
目的 观察猪带绦虫混合重组双歧杆菌(Bb)疫苗免疫仔猪后诱导产生的保护效果.方法 将40 d龄健康仔猪分为实验组和对照组,每组4头.实验组以1011菌落形成单位(CFU)重组Bb-TSO45W-4B疫苗和重组Bb-TSOL18疫苗,按1:1混合后灌胃免疫,间隔2周免疫1次,共免疫2次;对照组以Bb液体培养基(MRS)50 ml灌胃.在免疫后不同时间点(0、2、4、6、8周)取前腔静脉血,分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清IgG水平.末次免疫4周后用猪带绦虫卵进行攻击,感染3个月后剖杀仔猪,分离囊尾蚴,计算减蚴率;取前腔静脉血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC),采用ELISA法检测血清IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4及IL-10水平;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PBMC增殖水平.结果 实验组血清IgG水平在首次免疫后2~8周升高,在4周达较高水平,与对照组比较,差异有统计学意义(mg/L:270.64±1.94比207.74±2.24,t=42.479,P<0.05).攻击感染3个月后,实验组减蚴率为80.48%;实验组与对照组比较,血清IgG、IgG2a水平显著升高,IgG1水平显著降低(mg/L:364.15±11.52比245.94±8.81,89.74±1.13比62.61±0.84,20.52±1.00比34.11±0.65,t=16.303、38.579、-22.772,P均<0.05);PBMC培养上清液IL-2、IFN-γ水平显著升高,IL-4、IL-10水平显著降低(ng/L:215.24±3.31比174.19±2.14,28.21±0.27比17.69±0.28,40.35±0.34比52.57±0.29,71.34±0.36比94.82±0.45,t=20.839、53.623、-54.743、-81.266,P均<0.05);PBMC增殖水平显著升高(0.620±0.051比0.242±0.053,t=10.259,P<0.05).结论 猪带绦虫混合重组Bb疫苗可诱导仔猪产生一定的保护力,Th1型免疫应答在保护性免疫机制中起重要作用.
