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宁夏地区布鲁氏菌临床分离株OMP25基因序列特征分析
目的 采用PCR法扩增宁夏地区布鲁氏菌临床分离株OMP25基因并测序,分析OMP25基因序列特征,为布鲁氏菌鉴定以及基因克隆与表达研究提供参考.方法 参考GenBank公布的布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因序列设计1对引物,采用PCR法从宁夏地区分离株布鲁氏菌基因组中扩增OMP25基因并进行双向测序,测序结果用Contig Express软件拼接,采用DNAstar软件进行分析.结果 经鉴定,两分离株布鲁氏菌均为羊种3型,测序获得OMP25基因全长序列为638 bp,编码212个氨基酸,核苷酸序列与GenBank公布羊种布鲁氏菌OMP25基因同源性为99.9％,氨基酸序列同源性为99.7％.系统进化树显示,分离株与参考株布鲁氏菌亲缘关系相近,与羊种布鲁氏菌为同一个分枝.结论 宁夏地区布鲁氏菌分离株OMP25基因序列与参考菌株序列同源性高,且与羊种布鲁氏菌在同一分枝,表明OMP25基因序列是一个保守序列.该研究结果可为布鲁氏菌的分子生物学鉴定和诊断试剂的研制提供参考.
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舟山海岛鼠伤寒沙门菌肠毒素基因序列特征分析
目的 通过对6株鼠伤寒沙门菌肠毒素基因的进化特征分析,为舟山鼠伤寒沙门菌引起的食源性疾病防控提供理论依据.方法 收集定海、普陀两区的鼠伤寒沙门菌6株,用PCR方法检测肠毒素基因并对阳性产物进行测序,通过DNA star软件对序列进行比对,构建基因进化树及序列.结果 6株鼠伤寒沙门菌肠毒素基因检测结果均为阳性,基因序列比对结果显示6株鼠伤寒沙门菌肠毒素基因的同源性为100.0％,与印度鼠伤寒沙门菌A201菌株(KF032246)和美国鼠伤寒沙门菌Q1菌株(L16014)的肠毒素基因序列的同源性为99.2％和100.0％;与柠檬酸杆菌肠毒素的同源性为85.3％～ 88.4％;与其他致病菌同类基因的同源性分别为26.6％～45.0％.结论 近年来在舟山市流行的鼠伤寒沙门菌的肠毒素基因序列进化高度保守,与志贺菌、大肠埃希菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌及金黄色葡萄球菌的同类基因同源性较低,但与柠檬酸杆菌的肠毒素基因有较高的同源性应引起相关部门重视.
