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血清不耐热物质对噬菌体PL39杀灭铜绿假单胞菌的影响
目的 观察人血清和鼠血清中不耐热物质对噬菌体PL39杀灭不同克隆铜绿假单胞菌的影响. 方法 采用双层平板法筛选PL39敏感宿主菌;根据ERIC-PCR图谱分析敏感宿主菌的遗传差异性.分别添加新鲜及热灭活人血清和鼠血清,观察其对PL39杀灭不同敏感宿的影响. 结果 筛选到9株PL39敏感宿主菌,其中2株菌ERIC指纹图谱无明显不同,其他菌株的指纹图谱明显不同.9株菌均能完全抵抗人血清和鼠血清的溶菌作用;噬菌体PL39在两种血清中均能保持恒定的成斑活性,但在人血清中对9株宿主菌的杀灭作用均被抑制;在小鼠血清中,PL39对L39菌有一定杀灭作用,对其他宿主菌无杀灭作用;两种血清热灭活(56℃,30 min)后对PL39杀灭不同宿主菌作用无显著影响,与营养肉汤中的PL39杀菌作用相比差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 人血清和鼠血清中的不耐热物质均可影响噬菌体PL39对其宿主菌的杀灭作用.
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噬菌体PL39对铜绿假单胞菌L39感染小鼠的疗效观察
目的 通过体外试验观察噬菌体PL39对铜绿假单胞菌L39感染小鼠的治疗作用. 方法 小鼠腹腔注射L39菌液建立铜绿假单胞细菌L39所致小鼠重度感染模型,观察模型小鼠PL39治疗后的生存情况、健康状况并赋分;采用平板倾注法测定存活细菌数,测定PL39治疗组和对照组小鼠各组织脏器中PL39对L39的杀菌情况及PL39增殖情况;观察PL39在健康小鼠血清、热灭活健康小鼠血清、L39感染小鼠血清和热灭活L39感染小鼠血清中对L39菌的杀灭作用,测定不同血清中PL39对L39菌的吸附能力. 结果 小鼠腹腔注射总量108 CFU的L39菌建立铜绿假单胞菌重度感染模型,模型小鼠行尾静脉注射PL39治疗组的生存时间与无噬菌体治疗对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗组模型小鼠各组织脏器及全血中活菌数和噬菌体数与无噬菌体对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).PL39在噬菌体治疗2h热灭活健康鼠血清、热灭活感染鼠血清、营养肉汤对照组中存活细菌数分别为4.57±0.25×102 CFU/ml,4.48±0.41×102 CFU/ml和4.60±0.43×102 CFU/ml,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),与细菌对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);健康小鼠血清中的PL39杀菌作用与细菌对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),感染鼠血清中细菌数与细菌对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).感染鼠血清孵育1 min的L39被PL39吸附的活性显著降低,但灭活感染鼠血清或营养肉汤孵育后活性无显著影响(P＞0.05). 结论 PL39在健康鼠血清中对L39具有一定杀灭作用,但噬菌体的吸附作用可被血清中不耐热物质完全阻断导致其对由L39引起的小鼠全身感染治疗无效.
