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聚羟基丙烯酸组织固定在抗酸杆菌和Her2蛋白检测中的应用
目的 探讨环保固定液聚羟基丙烯酸在特殊染色法检测抗酸杆菌和免疫组化法检测乳腺癌Her2蛋白的应用价值.方法 收集病理证实的结核标本72例、麻风标本6例、乳腺浸润性导管癌标本1 16例,每例标本同一病变部位取材2块,分为A、B组.A、B组分别采用4％中性缓冲甲醛、聚羟基丙烯酸固定,各制作结核标本切片72张、麻风标本切片6张、乳腺癌标本切片116张.采用特殊染色法检测结核、麻风切片中抗酸杆菌,免疫组化法检测乳腺癌Her2蛋白,同时分析比较A、B组切片中抗酸杆菌阳性率、乳腺癌Her2蛋白阳性率的差异.结果 生物显微镜下,A、B组切片抗酸杆菌染色:背景洁净,细胞轮廓清晰,胞核完整呈蓝色,背景着色为淡蓝色,抗酸杆菌呈鲜红色,对比度好,阴性、阳性对照染色结果可靠.②生物显微镜下,A、B组切片Her2免疫组化染色:背景清晰,阳性着色定位准确(胞膜),阳性强度可靠、染色鲜明,无非特异性染色产生,阴性、阳性对照染色结果可靠.③A、B组切片抗酸杆菌阳性率分别为57.7％、59％,两组间阳性率差异不显著(P＞0.05),且抗酸杆菌检测结果符合率为98.7％.④A、B组切片Her2蛋白阳性率分别为24.1％、25.9％,两组间阳性率差异不显著(P＞0.05),且Her2蛋白检测结果符合率为98.3％.结论 在特殊染色法检测抗酸杆菌和免疫组化法检测乳腺癌Her2蛋白中,环保固定液聚羟基丙烯酸有潜能替代传统试剂4％中性缓冲甲醛,有望在临床推广应用.
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聚羟基丙烯酸在Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌中的应用
目的 探讨环保固定液聚羟基丙烯酸在Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌的应用价值.方法 手术切除且术后病理证实为结核病标本96例,每例标本同一病变部位取材2块,用抽签法随机分为A、B组.A组采用4％中性缓冲甲醛固定,B组采用聚羟基丙烯酸固定,均制作切片96张.采用Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌,使用SPSS20.0分析比较A、B组切片结核杆菌阳性率的差异.结果 ①生物显微镜下,两组切片染色结果:背景洁净、细胞轮廓清晰、胞核呈蓝色,背景着色为淡蓝色、结核杆菌呈鲜红色、对比度好.且同一病变部位B组切片显示结核杆菌数量显著多于A组.②A、B两组切片结核杆菌阳性率分别为58.3％和66.7％,两组间阳性率差异显著(x2=6.125,P＜0.05).结论 环保固定液聚羟基丙烯酸有潜能替代传统试剂4％中性缓冲甲醛应用于Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌.
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聚羟基丙烯酸和Van-clear替代甲醛和二甲苯在苏木精伊红染色的应用比较
病理诊断是医学界公认的疾病诊断"金标准",而及时和恰当的固定、透明与脱腊是制作石蜡切片及苏木精伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色的重要步骤.甲醛作为固定液、二甲苯作为透明脱蜡液是病理学界的一贯做法.国内外相关研究发现甲醛具有致癌和促癌作用[1-2].二甲苯对眼及上呼吸道有刺激作用,长期接触有神经衰弱综合症,女性有可能导致月经异常,严重危害病理工作者的身心健康[3-4].因此,寻找环保的固定、透明脱蜡液具有十分重要的意义.作者经多次临床实践证实:聚羟基丙烯酸替代甲醛、Van-Clear替代二甲苯取得了满意实验结果.那么环保试剂聚羟基丙烯酸和Van-clear共同替代传统固定液甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯制作的组织切片在HE染色中的效果如何?这是一个非常有悬念的学术问题.
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聚羟基丙烯酸在宫颈组织P16蛋白表达检测中的应用
目的:观察聚羟基丙烯酸(环保固定液)与10％中性缓冲福尔马林(传统固定液)在免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达的结果,探讨其替代10％中性缓冲福尔马林的可行性.方法:收集2015年3月—2017年11月于南方医科大学附属中山博爱医院门诊及妇科住院部送检的宫颈组织标本245例,其中包括正常及慢性宫颈炎组52例,低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组87例,高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组61例,宫颈癌组45例.同一病变部位取材2块,随机分2组,命名为A、B组.A组采用10％中性缓冲福尔马林固定制作切片245张;B组采用聚羟基丙烯酸固定制作切片245张.采用免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达情况.结果:①生物显微镜下,A、B组切片均背景清晰、阳性着色定位准确、阳性强度可靠、呈色鲜明,无非特异性染色产生、阴性和阳性对照染色结果可靠.②慢性宫颈炎组、LSIL组、HSIL组及宫颈癌组的A组P16蛋白阳性率分别为5.77％、35.63％、80.33％和100.00％,慢性宫颈炎组、LSIL组、HSIL组及宫颈癌组的B组P16蛋白阳性率分别为5.77％、33.33％、81.97％和100.00％.A、B组间对应的各级宫颈病变,P16蛋白表达阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:用聚羟基丙烯酸替代10％中性缓冲福尔马林对免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达阳性率无明显影响,聚羟基丙烯酸作为固定液在免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达中有一定的使用价值.
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聚羟基丙烯酸和4%中性缓冲甲醛对苏木精伊红染色及荧光原位杂交检测乳腺癌HER-2基因影响的比较
背景与目的：适当的组织固定、透明脱蜡是苏木精伊红(hematoxylin eosin，HE)染色及荧光原位杂交(lfuorescencein situ hybridization，FISH)检测乳腺癌HER-2基因一个重要的步骤。该研究旨在对比环保固定液聚羟基丙烯酸和4%中性缓冲甲醛固定制作的组织切片HE染色优良率，荧光原位杂交检测两者固定制作的乳腺癌组织切片的HER-2基因扩增阳性率，探讨其替代传统固定液4%中性缓冲甲醛的可行性。方法：收集中山市博爱医院2011年3月—2015年1月门诊及住院部送检的乳腺癌69例、乳腺纤维腺瘤41例、子宫平滑肌瘤40例、宫颈组织25例、胎盘组织25例，各取材2块，每例标本的2块组织用抽签法随机分2组，一组采用4%中性缓冲甲醛固定制作HE切片200张，另一组采用聚羟基丙烯酸固定制作HE切片200张。依据切片染色情况判定切片等级，采用SPSS 19.0比较两者HE染色优良率；两组乳腺浸润性导管癌组织再各制作切片69张，采用SPSS 19.0比较FISH技术检测的HER-2基因扩增率。结果：①聚羟基丙烯酸、4%中性缓冲甲醛固定组组织切片HE染色优质片分别为155张、166张，优良片41张、33张，中等片3张、1张，差片1张、0张，染色优良率分别为98.0%、99.5%，两组间优良率差异无统计学意义(χ2=1.33，P=0.25)。②聚羟基丙烯酸、4%中性缓冲甲醛固定组组织切片FISH阳性率分别为26.09%、23.19%，两组间阳性率差异无统计学意义(χ2=0.50，P＞0.05)。结论：聚羟基丙烯酸固定制作的组织切片HE染色效果及荧光原位杂交检测乳腺癌HER-2基因扩增效果跟传统固定液4%中性缓冲甲醛相比差异无统计学意义，符合环保要求，有推广使用的可能。
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聚羟基丙烯酸和Van-clear在qRT-PCR法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变中的应用研究
目的 比较环保固定液聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统固定液4％中性缓冲甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯应用于实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法,检测非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变率的敏感性、特异性及符合率的差异,评估qRT-PCR法及其环保技术平台的临床应用价值.方法 选取中山市博爱医院、中山市中医院2013年5月至2016年3月期间手术切除的原发性NSCLC标本91例,同一肿瘤病变部位切取5个样本,采用随机数字表法分为A、B、C、D、E.A组使用4％中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、直接测序法检测EGFR基因突变;B组使用4％中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;C组使用聚羟基丙烯酸固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;D组使用4％中性缓冲甲醛固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;E组使用聚羟基丙烯酸固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变.分别测定5组NSCLC中EGFR基因第18、19、20、21号外显子的突变情况.结果 ①B、C、D、E组与A组比较,EGFR基因发生突变人数百分率、基因靶位点突变率的差异均无统计学意义(P>0.05);②B、C、D、E组与A组比较,EGFR靶位点突变检测结果的灵敏度好、特异度强、符合率高.结论 聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统试剂,应用于qRT-PCR法检测NSCLC中EGFR基因突变,与以传统试剂应用于直接测序法的检测结果一致性好,有在临床推广应用的意义和价值.
