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天龙咳喘灵提取物抑制A549细胞上皮-间质转化中的微RNA表达变化
目的 探讨天龙咳喘灵提取物抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导A549细胞上皮-间质转化(EMT)过程中微RNA(miRNA)的表达变化.方法 体外培养A549细胞,TGF-β1刺激A549细胞60 min后加入天龙咳喘灵提取物,应用相差显微镜观察A549细胞形态学变化.反转录-PCR、免疫印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA和蛋白表达.miRNA芯片检测A549细胞EMT前后miRNA表达的变化.结果 细胞形态学观察、反转录-PCR及免疫印迹检测均显示,5μg/L TGF-β1可以诱导A549细胞EMT且可以被50 mg/L天龙咳喘灵提取物抑制或逆转.miRNA芯片检测显示,与未处理的A549细胞比较,A549细胞EMT后有41种miRNA表达出现显著改变,其中26种表达上调2倍以上,15种表达下调2倍以上;与未处理的A549细胞比较,50 mg/L天龙咳喘灵提取物抑制TGF-β1诱导A549细胞EMT后有46种miRNA的表达出现显著变化,其中25种表达上调2倍以上,21种表达下调2倍以上;与TGF-β1诱导A549细胞EMT比较,50 mg/L天龙咳喘灵提取物抑制A549细胞EMT时有17种miRNA差异表达,其中13种表达下调2倍以上,4种表达上调2倍以上.结论 天龙咳喘灵提取物可以抑制TGF-β1诱导的A549细胞EMT,并参与调控miRNA的差异表达,可能有助于阻止慢性肺部纤维化疾病的进展.