首页 > 文献资料
-
真皮间充质干细胞的研究进展
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一类具有多向分化潜能和高度自我复制能力的组织干细胞,来源于发育早期的中胚层和外胚层.MSCs初在骨髓中发现,随后发现在个体发育的其他组织中也存在该细胞.本世纪初有研究者从幼年和成年的啮齿动物皮肤真皮组织中分离得到了干细胞,并称之为皮肤前体细胞.随后,从胎儿、成人、老年供体的真皮结缔组织中得到了有跨胚层分化潜能的MSCs,第一次真正意义上证实了真皮组织中确实存在MSCs,并命名为真皮间充质干细胞(dermis mesenehymal stem cells,DMSCs).本文就DMSCs的分离、培养、生物学特性及其临床应用前景做一综述.
-
壳聚糖-丝素支架与真皮间充质干细胞的体外复合培养
背景:壳聚糖与丝素有各自的优点和不足,将两者共混,可取长补短,改善性能.进行壳聚糖-丝素支架与真皮间充质干细胞体外复合培养的研究,可进一步为工程化组织构建打下基础.目的:将壳聚糖-丝素支架与大鼠真皮间充质干细胞体外复合培养,探讨壳聚糖-丝素支架对真皮间充质干细胞吸附、生长及增殖的影响.方法:①壳聚糖和丝素以质量比为3:7充分搅拌混匀,冻干制作壳聚糖-丝素海绵状支架,并测其孔径、孔隙率等指标.②将该支架与大鼠真皮间充质干细胞复合进行体外培养,倒置相差显微镜观察细胞与支架复合生长、基质形成以及细胞与支架结合的情况.分别于培养6,12,24 h消化支架上的细胞,计算细胞吸附率.于培养2,4,6,8,10 d后,用MTT法检测细胞增殖率情况.以无支架的细胞培养作为对照组.结果与结论:①倒置相差显微镜及扫描电镜下观察发现该支架有分布较均匀且细密的小孔,孔与孔之间相互连通,孔径大小较均匀,孔径在100～150 μm之间,孔隙率为90.3%.②24 h内,真皮间充质干细胞对支架的黏附率随着时间的增加而逐渐增高,24 h时的黏附率为93%,表明真皮间充质干细胞可良好地黏附于壳聚糖-丝素支架上.③MTT法检测细胞增殖结果显示,于培养各检测时间点,实验组与对照组比较差异均无显著性意义.于培养早期(第2,4天),对照组增殖细胞数略高于实验组;于培养第10天,实验组的增殖细胞数略高于对照组.倒置相差显微镜观察细胞于支架上的形态和附着良好,并有较旺盛的细胞基质分泌.表明真皮间充质干细胞在该支架上能良好地生长、增殖.提示壳聚糖-丝素支架是真皮间充质干细胞体外培养的良好支架材料.
-
真皮间充质干细胞成骨分化的研究进展
骨组织工程技术修复骨组织的缺损显示了广阔的应用前景.真皮间充质干细胞(Dermal mesenchymal stem cells,DMSCs)来源于皮肤组织,易大量获取,对供区损伤极小,具有包括成骨分化在内的多向分化潜能,有望成为骨组织工程研究合适的种子细胞.我们就真皮间充质干细胞成骨分化的研究进展进行综述.
-
应用真皮间充质干细胞促进皮肤缺损创面修复方法的实验研究
目的:将大鼠真皮间充质干细胞(DMSC)与鼠尾胶原蛋白Ⅰ型共培养后形成复合物移植到大鼠皮肤缺损处,以研究该类方法在皮肤缺损愈合过程中的作用.方法:提取、分离、扩增培养雄性sD大鼠的DMSC,将DMSC与鼠尾胶原蛋白I型共培养1天后制成移植物;选择雌性sD大鼠15只制作皮肤缺损模型,每只大鼠背上各制作2个2×2 cm2大小的全层皮肤缺损,然后随机分成3组,每组10个创口,A组移植DMSC/鼠尾胶原蛋白复合物,B组仅移植鼠尾胶原蛋白,C组不移植任何东西,自然愈合.手术后,早期观察创面的渗出情况,红肿情况;中期观察创口的收缩情况,结痴情况;后组织学检查观察创面的愈合情况,并通过PCR来检测组织内是否含有性别决定基因SRY,以此来明确新生组织中是否含有移植的雄性DMSC分化或增殖的细胞.结果:早期创口C组渗出多,A组和B组相差不多,但均较C组渗出少.红肿情况也是C组明显.术后2周,A组创口均已修复(10/10),B组有9/10修复,C组创口明显收缩,收口处不规则,还有红肿.组织学检查显示,A组修复皮肤接近正常,B组、C组均为较差的疤痕组织修复.SRY-PCR检测发现A组雌性大鼠修复皮肤中含有sry基因,而B组、C组均未检出.结论:应用DMSC移植治疗的方法对大鼠皮肤缺损显示出明显的促修复功能.
-
重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染
目的克隆血小板衍生生长因子A链(platelet-derived growth factor A chain,PDGF-A)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP) 载体pEGFP-N1为骨架,携带PDGF-A基因进入真皮间充质干细胞(dermis-drived mesenchymal stem cells, DMSCs),为采用转入PDGF-A基因的DMSCs修复创面奠定基础.方法采用RT-PCR二步分离法,以人肝癌细胞系(SMC-7721)的总RNA为模板,扩增PDGF-A基因的全长cDNA编码序列,克隆入载体pMD18-T,随后又将PDGF-A基因亚克隆入pEGFP-N1载体中,构建PDGF-A基因的真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A,并采用Fugene 6介导转染技术将PDGF-A基因导入DMSCs. 结果克隆到PDGF-A基因的全长cDNA序列,经测序验证,其序列与GenBank所报告的该基因的序列完全一致.结论成功地将PDGF-A基因克隆到pEGFP-N1载体中,并实现了PDGF-A基因在DMSCs的表达.
关键词： 克隆 真核表达载体 血小板衍生生长因子A链基因 绿色荧光蛋白 真皮间充质干细胞 -
银屑病患者真皮间充质干细胞中细胞因子受体因子-1白细胞介素-6水平的变化特征分析
目的:分析银屑病患者真皮间充质干细胞(DMSCs)中细胞因子受体因子-1(CRLF1)白细胞介素-6(IL-6)水平的变化特征.方法:以2016年12月-2018年12月间入本院治疗的41例银屑病患者为A组研究主体.以同期入院进行皮肤组织检测的41例健康人员为B组研究主体.对其进行皮损处DMSCs鉴定,分析CRLF1与IL-6水平变化.结果:A组的CRLF1与IL-6水平低于B组,对比差异显著(P＜0.05).结论:银屑病患者经DMSCs鉴定后表现出CRLF1与IL-6低水平变化,说明其出现异常表达情况,可作为该病的评估标准之一.
关键词： 银屑病 真皮间充质干细胞 细胞因子受体因子-1 白细胞介素-6
