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神经元核心抗原和神经元特异性烯醇化酶在人胚胎脊髓发育阶段的表达
目的 探讨神经元核心抗原(NeuN)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在人胚胎脊髓发育阶段的分布规律及其表达意义.方法 应用免疫组织化学法检测第2、3、4个月龄段,共16例人胚胎,脊髓前角、后角中NeuN和NSE的表达、分布状况.结果 在脊髓后角处:第2个月胚龄段,NeuN呈阴性表达,部分细胞呈NSE阳性表达;第3个月胎龄段,部分细胞开始呈NeuN阳性表达,NSE则呈广泛阳性表达;第4个月胎龄段,NeuN阳性细胞表达数量和强度均较前增高,NSE阳性表达与第3个月龄相似.在人胚胎脊髓前角处:第2～4个月龄段,NeuN和NSE呈广泛阳性表达.结论 人胚胎脊髓发育第2～4个月龄段,NeuN和NSE阳性表达在脊髓的前角处早于后角,NeuN和NSE参与脊髓神经元的发育成熟过程.
关键词： 脊髓 神经元核心抗原 神经元特异性烯醇化酶 免疫组织化学 人胚胎 -
壮通饮对脑梗死大鼠内源性神经干细胞的影响
目的 观察壮通饮对脑梗死大鼠内源性神经干细胞(NSC)增殖分化表达的影响.方法 将240只雄性大鼠随机分为模型组、假手术组、壮通饮治疗组、正常组,采用线栓法制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别给予不同处理,于术后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d 6个时间点分批处死大鼠.用免疫组织化学方法检测各组大鼠梗死区域及相对应区域的神经元核心抗原(NeuN)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)标记的阳性细胞情况.结果 模型组脑缺血区域相对应区域可见大量的 NeuN、GFAP标记阳性细胞,差异均无统计学意义(P>0.05),与假手术组相比,模型组和壮通饮治疗组大鼠 GFAP标记阳性细胞数目增多,NeuN标记阳性细胞数目减少,差异均有统计学意义(P<0.05),与模型组相比,壮通饮治疗组大鼠 NeuN、GFAP 标记阳性细胞数目均增多,第14天时 NeuN、GFAP标记阳性细胞数目达到高峰,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 壮通饮可以促进脑梗死后内源性神经干细胞的增殖,并诱导分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等,但特异性不明显.新分化的神经元有正常的兴奋性,可以和其他神经元形成突触联系,表明壮通饮诱导的神经元可以发挥正常的神经功能.
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小鼠出生后嗅球层状结构发育变化研究
目的 探讨小鼠出生后嗅球层状结构的发育变化.方法 取小鼠出生当天、出生后10、20、30、45、60、75、90 d嗅球,采用HE染色,以神经元核心抗原(NeuN)特异性抗体进行免疫组化染色,观察其结构变化.结果 新生小鼠嗅球无层状结构,NeuN在周边散在分布,出生后10 d嗅球层状结构可初步辨识,NeuN表达逐渐向内迁移;出生后20 d嗅球清晰出现突触小球层;出生后30 d嗅球层状结构清晰,NeuN迁移至内丛状层;出生后30~90 d,嗅球结构无明显变化.结论 小鼠出生后10~20 d嗅球层状结构发育变化明显,出生后30 d完成嗅觉在嗅球水平的修饰.
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基于p-Akt信号评价加减薯蓣丸对脑缺血大鼠海马神经元损伤的保护作用
目的:观察补益精血方“加减薯蓣丸”对脑缺血大鼠海马神经元及磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-serine-threonine kinase,p-Akt)的影响.方法:40只Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和中药组,其中模型组、中药组采用改良双侧颈总动脉永久阻断法制作脑缺血大鼠模型,假手术组不予结扎颈总动脉.中药组予加减薯蓣丸10g·kg-1 ·d-1灌胃,其余3组用等量0.9％ NaCl溶液灌胃.灌胃6周后取材,HE染色观察海马组织形态学变化,免疫荧光法检测神经元核心抗原(NeuN)表达,Western blot法检测p-Akt表达.结果:HE染色结果显示,模型组大鼠海马细胞密度减少,锥体细胞层变薄,细胞间隙大,排列疏松,细胞核萎缩;中药组大鼠海马细胞密度增加,锥体细胞层变厚,细胞间隙减小,排列紧密,细胞核萎缩减少.模型组大鼠海马组织p-Akt表达较假手术组明显下降(P＜0.05),NenN表达较假手术组明显增加(P＜0.05);与模型组比较,中药组海马组织NenN及p-Akt表达均明显增加(P＜0.05).结论:加减薯蓣丸可促进脑缺血大鼠海马组织p-Akt及NeuN表达,从而可能促进脑缺血引起的大鼠海马神经损伤修复,抑制神经元凋亡.
关键词： 脑缺血 加减薯蓣丸 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 海马 神经元核心抗原 -
行为学训练对海马梗死大鼠齿状回区神经干细胞分化能力的影响
目的 研究行为学训练对海马梗死大鼠齿状回区神经干细胞分化能力的影响.方法 将78只SD大鼠随机分为梗死训练组、单纯梗死组及正常对照组.采用光化学法将梗死训练组及单纯梗死组大鼠制成单侧海马梗死模型,梗死训练组大鼠于造模结束后次El给予水迷宫训练,单纯梗死组大鼠于造模结束后正常饲养.未给予水迷宫训练.采用免疫荧光双标法观察各组大鼠不同时间点海马齿状回区溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、神经元核心抗原(NeuN)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的标记情况.结果 正常对照组海马齿状回区可见少量BrdU/NeuN、BrdU/GFAP阳性双标染色;在术后14～35 d期间,梗死训练组及单纯梗死组大鼠海马齿状回区BrdU/NeuN、BrdU/GFAP阳性双标染色均较正常对照组显著增强(均P<0.05);并且以梗死训练组BrdU/NeuN、BrdU/GFAP的增强幅度较显著,与单纯梗死组比较,组间差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 行为学训练能促进脑缺血大鼠海马神经干细胞向神经元及星形胶质细胞分化,对改善其学习、记忆功能具有重要作用.
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神经元核心抗原在小鼠嗅球和嗅上皮发育中的表达
目的:探讨神经元核心抗原(NeuN)在嗅球和嗅上皮发育过程中的表达特性和意义.方法:在小鼠胚胎发育9.5、11.5、14.5、17.5 d,出生当天和3个月成年个体的头部切片标本中,以免疫荧光染色方法检测NeuN的表达.结果:刚出生小鼠嗅球内层状结构尚不明显,NeuN表达于嗅球周边区域.在3个月大成年小鼠,嗅球的层状结构已清晰可见,NeuN表达阳性的成熟神经元主要聚集于接近嗅球中心的颗粒细胞层.位于嗅上皮的双极嗅感觉神经元在小鼠胚胎和成年个体中均未见NeuN表达.结论:NeuN通常被认为表达于几乎所有部位的成熟神经元.但在嗅球和嗅上皮中,NeuN只表达于成熟嗅球中的颗粒细胞层.小鼠出生到发育为成熟个体的过程中,NeuN表达阳性的成熟神经细胞由周边逐渐向嗅球中心迁移,可能与气味模式的形成有关.
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神经元核心抗原和神经元特异性烯醇化酶在人胚胎小肠发育阶段的表达
目的:探讨神经元核心抗原(neuronal nuclear antigen,NeuN)和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)在人胚胎小肠发育阶段的分布规律及其表达意义.方法:应用免疫组织化学法检测第2～4月龄段共16例人胚胎小肠壁细胞NeuN和NSE的表达、分布状况.结果:第2～4月胎龄段,NSE在人胚胎小肠肌间神经丛内的神经元及神经纤维均呈强阳性表达,在黏膜下层,随着胎龄的增大,NSE阳性表达细胞和纤维数量逐渐增多,在肠腺内均有少量散在分布的NSE阳性细胞;在黏膜层的腺体和上皮组织内均有散在的NeuN阳性细胞分布,随着胎龄的增大,NeuN阳性细胞数量增多;在肌间神经丛,第3月龄段开始,有少量NeuN阳性细胞,随着胎龄的增大,NeuN阳性细胞数量逐渐增多;在黏膜下层,未见NeuN阳性细胞分布.结论:人胚胎小肠发育阶段,NeuN和NSE在小肠壁的阳性表达和分布不一致,均参与小肠壁神经元及神经内分泌细胞的发育过程.
