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实时定量聚合酶连反应文献资料
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转化生长因子-β和Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达
目的 探讨转化生长因子-β(TGF-β)、Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,分析其与卵巢功能衰退的关系.方法 雌性SD大鼠分为对照组(C组,6月龄,阴道涂片筛选,n=9)、绝经过渡期组(MT组,12 ～ 14月龄,阴道涂片筛选,n=8),大鼠麻醉处死后迅速取出卵巢,采用机械分离方法释放卵泡颗粒细胞,于CO2培养箱中培养,利用免疫细胞化学法检测促卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白的表达,鉴定卵巢颗粒细胞;免疫细胞化学法检测TGF-β、Smad4蛋白在两组卵巢颗粒细胞的表达;采用Real-time PCR的方法检测各组颗粒细胞中TGF-β、Smad4 mRNA的表达.结果 免疫细胞化学显示分离培养的颗粒细胞纯度＞95％,MT组TGF-β、Smad4蛋白表达水平低于对照组(P ＜0.05);Real-time PCR结果显示,两组均有TGF-β、Smad4 mRNA的表达,MT组TGF-β、Smad4 mRNA表达水平显著低于对照组(P＜0.05).结论 TGF-β、Smad4参与绝经过渡期大鼠卵巢功能的衰退过程,绝经过渡期大鼠功能衰退的部分原因可能与卵巢颗粒细胞中TGF-β、Smad4的表达降低有关.
