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肝素辅因子Ⅱ的研究进展
肝素辅因子Ⅱ(heparin cofactor Ⅱ,HCⅡ)是一种存在于血浆中的单链抗凝血酶糖蛋白,其作用机制是通过诱导凝血酶与之行成1∶1稳定复合物,从而使凝血酶失去蛋白水解酶活性,在适量的硫酸皮肤素参与下,这种反应可以加快1 000倍.HCⅡ不同于抗凝血酶Ⅲ,它主要是在血管系统外,在特殊的病理环境下发挥对凝血酶的调节作用.近来研究发现,HCⅡ与血管损伤后血栓形成及动脉粥样硬化的病理进程密切相关.HCⅡ可以被中性粒细胞释放的弹性蛋白酶水解,生成的N端多肽片段对中性粒细胞和单核细胞具有趋化作用,从而参与炎症反应.
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毛细管电泳法对肝素钠注射液中杂质的测定
目的:在2008年国家食品药品监督管理局颁布的"毛细管电泳法分析肝素钠杂质的补充检验方法"的基础上优化毛细管电泳色谱条件,对全国评价性抽验肝素钠注射液样品进行测定.方法:采用毛细管电泳法,缓冲液为pH 3.0的400 mmol·L-1三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液;分离电压为-25 kV;检测波长为200 nm;进样压力3.447 kPa,进样时间为4 s;毛细管温度:25℃.结果:肝素主峰与多硫酸软骨素峰峰之间分离度为1.0,与硫酸皮肤素之间分离度为2.0,10批供试品的杂质含量结果与离子色谱法结果基本一致.结论:优化后的色谱条件使肝素与硫酸皮肤素、多硫酸软骨素的分离度增加,该方法使肝素钠样品中的杂质定性、定量更为准确.
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阴离子交换HPLC法精确测定肝素钠中的多硫酸软骨素和硫酸皮肤素
目的:建立可同时测定肝素钠中的多硫酸软骨素(OSCS)和硫酸皮肤素(DS)等杂质的有关物质检测方法.方法:应用高效液相色谱-紫外可见光检测器,2种阴离子交换树脂为填充剂的色谱柱,在pH3.0的酸性体系下,设计了5种由不同流动相体系、洗脱梯度和不同阴离子交换柱组成的分析方法,比较了其分离度.结果:5种方法中以方法E灵敏度高,理论塔板数和分离度也高,多硫酸软骨素的检测限和定量限分别为0.025％和0.03％；硫酸皮肤素的检测限和定量限分别为0.03％和0.05％；多硫酸软骨素和硫酸皮肤素的加标回收率分别为102.5％和96.0％.结论:采用方法E的弱阴离子交换HPLC法与现有药典标准方法相比,具有更好的灵敏度和准确度.
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人内皮细胞特异性因子-1与动脉粥样硬化
ESM-1即内皮细胞特异性分子-1，其在人类的肾内皮细胞中表达量少，更多的表达在人类的肺内皮细胞。一开始由人类从HUVEC（人脐静脉内皮细胞）cDNA文库中克隆处理[1]。ESM-1是一种硫酸皮肤素蛋白聚糖（DSPG），可溶于血液并在机体的多种调节功能中发挥作用。据之前的研究表明，ESM-1与冠心病动脉粥样硬化（AS）形成过程存在相关性。因此，加强对ESM-1的研究有助于进一步了解的AS形成。ESM-1的cDNA序列全长2006个碱基对，包含一个长度为552个核苷酸的开放阅读框，和1398个核苷酸的3’端非编码区，它的结构是由单一基因编码，由一条含有165个氨基酸的核心蛋白以及一条硫酸皮肤素（DS）单链位于137位的丝氨酸残基共价结合而成，能以可溶的形式释放入血液循环[2]。
