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胰腺癌BxPC3细胞中Src激酶对Notch-1活化的调节
目的 探讨在胰腺癌细胞BxPC3中,Src激酶对Notch-1活化的影响.方法 用siRNA干扰的方法分别抑制Notch-1和c-Src的表达;加入Src激酶抑制剂PP2抑制Src激酶活性;MTT法检测细胞的生长;Western blot检测Notch-1蛋白活性形式NICD水平的变化.结果 抑制Notch-1表达及抑制Src激酶活性可明显抑制BxPC3细胞生长;抑制Src激酶活性及抑制c-Src蛋白表达可下调Notch-1 NICD水平.结论 Src激酶在胰腺癌细胞BxPC3中促进Notch-1的活化,促进BxPc3细胞的生长.
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Rab5在胰腺癌细胞BxPC3中对Notch1活性的调节
目的 本研究拟阐明内吞调节蛋白Rab5在Notch活化中的作用.方法 用RNA干扰的方法抑制BxPC3细胞中Rab5蛋白的表达,用Western blot测定Notch1活性型Notch ICD的表达.用Wortmannin和LY294002抑制PI3激酶的活性,观察Notch活性的变化.结果 抑制Rab5蛋白的表达,或者抑制PI3激酶的活性后,Notch1的活性型Notch ICD的表达量均显著下降,同时BxPC3细胞的生长受到抑制.结论 在胰腺癌细胞BxPC3中内吞调节蛋白质Bab5和PI3激酶在Notch活化中起着关键的作用,提示Notch的活化依赖于内吞.
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Plk1在胰腺癌细胞中的表达及其临床意义
目的 探讨胰腺癌细胞系中Plkl表达的意义.方法 以胰腺癌细胞株(AsPC-1、PANCl、BxPC3)和正常胰腺细胞株(HPDE6C7,一种永生但非转化的胰腺上皮细胞来源的细胞株)为研究对象,应用RT-PCR检测Plk1 mRNA的表达,用Western blot检测Plk1蛋白的表达.结果 Plk1 mRNA和Plk1蛋白在胰腺癌细胞中均有高表达,而在正常胰腺细胞株中几乎不表达.结论 Plk1在胰腺癌细胞中的表达具有一定肿瘤特异性,有可能成为胰腺癌治疗的新靶标.
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华蟾素注射液诱导人胰腺癌细胞阻滞于G2/M期抑制细胞增殖的实验研究
目的 通过观察华蟾素注射液(Cmobutacini)对人胰腺癌细胞株SW 1990、BxPC3细胞周期的影响以探讨其抑制肿瘤细胞增殖的作用机理.方法 采用CCK-8法检测法在不同的时间点(12h、24 h、48 h、72 h和96 h)检测华蟾素注射液对人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测对细胞周期的影响.结果 华蟾素注射液对人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3具有抑制细胞增殖的作用,并具有时间及剂量依赖性.其中对SW1990的半数抑制率浓度(IC50)为(8.92±1.98) mg/mL,对BxPC3的半数抑制率浓度(IC50)为(5.00 ±0.66)mg/mL.流式细胞术检测发现,华蟾素注射液可使人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3阻滞于的G2/M期.结论 华蟾素注射液能通过诱导人胰腺癌细胞SW1990、BxPC3阻滞于G2/M期以抑制细胞增殖,为临床应用华蟾素注射液治疗胰腺癌提供实验依据.
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华蟾素对人胰腺癌细胞BxPC3细胞增殖和细胞周期的影响
目的 观察华蟾素(cmobutacini)对人胰腺癌细胞株BxPC3的细胞增殖和细胞周期的影响并探讨其可能的作用机理.方法 将不同浓度的华蟾素作用于人胰腺癌细胞株BxPC3,采用CCK-8法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞周期的变化.结果 华蟾素明显抑制人胰腺癌细胞株BxPC3的细胞增殖,其作用随华蟾素浓度增加而增强(P＜0.05)；流式细胞术检测细胞周期发现,华蟾素可使人胰腺癌细胞株BxPC3阻滞于的S期.结论 华蟾素能明显抑制人胰腺癌细胞株BxPC3的细胞增殖,可使肿瘤细胞阻滞于细胞周期的S期,阻止其进入分裂期,这可能是抑制细胞增殖的作用机理之一.
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下调转录因子HOXB7抑制胰腺癌BXPC3细胞侵袭及迁移机制研究
目的:研究在胰腺癌细胞株BXPC3中转染shRNA干扰转录因子HOXB7的表达后,BXPC3细胞侵袭及迁移能力的变化.方法:Real-time PCR及Western blot印迹方法分别检测HOXB7基因mRNA及蛋白在正常人胰腺导管上皮细胞HPDE、胰腺癌细胞株BXPC3中的表达;在胰腺癌细胞株BXPC3细胞中转染HOXB7shRNA及阴性对照shRNA,mRNA及蛋白水平检测转录因子HOXB7的干扰效果;Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力;划痕实验检测各组细胞迁移能力的变化.结果:Real-time PCR及Western blot结果显示HOXB7基因mRNA及蛋白在BXPC3细胞株中表达明显高于正常人胰腺导管上皮细胞HPDE(P＜0.05).在BXPC3细胞中转染HOXB7 shRNA后HOXB7的mRNA及蛋白表达水平均明显受到抑制;Transwell侵袭实验及划痕实验显示细胞侵袭能力及迁移能力均显著降低.结论:胰腺癌细胞株BXPC3中干扰转录因子HOXB7表达后,细胞侵袭及迁移能力明显降低.
