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ALAS-1文献资料
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PGC-1β调节大鼠ALAS-1基因表达机制的初步探讨
目的 检测PGC-1β在人肝癌细胞(Hep G2)和大鼠肝原代细胞中调节大鼠ALAS-1基因表达.方法 在Hep G2细胞中瞬时转染PGC-1β,用双荧光报告系统检测过表达PGC-1β时大鼠ALAS-1启动子报告基因的活性变化.同时构建了5'端顺式元件系列截短和突变的ALAS-1启动子报告基因,检测并分析介导PGC-1β作用的转录因子结合元件.分离肝原代细胞并检测PGC-1β对ALAS-1转录的影响.构建干扰NRF-1基因的siRNA腺病毒,证明NRF-1介导PGC-1β激活ALAS-1启动子转录的作用.结果 在Hep G2细胞中,过表达PGC-1β显著促进ALAS-1表达.分别构建了FoxA2和NRF1结合元件突变的ALAS-1启动子,发现PGC-1β对NRF1突变的ALAS-1启动子的激活作用显著下降,而FoxA2作用不明显.在肝原代细胞中过表达PGC-1β促进了ALAS-1的转录.当用小RNA干扰NRF-1的表达后,则抑制了PGC-1β对ALAS-1转录的促进作用.结论 在Hep G2和大鼠肝原代细胞中,PGC-1β能够促进ALAS-1基因的表达,并且这种作用是通过NRF-1介导完成的.
