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表达鸡传染性支气管炎病毒JS/95/03株S1蛋白的重组杆状病毒构建
鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)引起的鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)是鸡的一种急性、高度接触性传染性疾病,以呼吸道症状、肾炎和蛋产量和蛋品质下降为主要特征.由于病毒的高度变异性,产生了众多的血清型,不同血清型间缺乏有效的交叉保护作用,给免疫预防带来了很大的困难.近年来,该病的流行呈上升趋势,已成为继新城疫、传染性法氏囊病和马立克氏病后的又一大传染病,给世界养禽业造成了巨大的经济损失.
关键词： 传染性支气管炎病毒(IBV) S1基因 S1蛋白 杆状病毒表达载体 表达 -
表达不同致病型S基因重组鸡传染性支气管炎病毒的细胞嗜性研究
鸡传染性支气管炎病毒(IBV)在体外进行细胞培养比较困难,并且不同来源毒株在易感性上也存在差异.为揭示IBV适应CK细胞培养的分子基础,优化其细胞培养技术,本研究首先对H120疫苗株和IBYZ分离株的分子克隆株rH120和rIBYZ,在鸡胚、鸡气管环以及原代鸡肾细胞(CK)上培养时组织细胞的嗜性差异进行了比较,结果发现rIBYZ与rH120在CK上的亲嗜性存在显著差异.在此基础之上,课题组借助前期建立的IBV反向遗传操作系统,将H120疫苗株和IBYZ株的S基因进行交叉替换,成功拯救获得2株重组病毒rH120-S/YZ和rIBYZ-S/H120.通过比较不同毒株感染CK细胞后的病变、特异性免疫荧光的强度以及病毒的增殖曲线,表明刺突蛋白(S)在IBV适应CK细胞过程中发挥决定性作用.本文揭示了S蛋白对细胞嗜性的影响,为进一步探索IBV适应细胞的分子机制奠定了基础.
关键词： 传染性支气管炎病毒(IBV) 刺突蛋白(S) 细胞嗜性 反向遗传 -
鸡传染性支气管炎病毒两个地方分离株S1基因的扩增克隆与序列分析
对IBV肾型毒株JS/95/03和呼吸型毒株SD/97/01的S1全基因进行了扩增、克隆和序列测定,将两毒株的S1基因序列与10个参考毒株进行了比较.结果表明,JS/95/03和SD/97/01分别与M41和H120株亲缘关系近,它们可能是疫苗毒株的变异株.JS/95/03和SD/97/01间的亲缘关系也较近,两者S1蛋白中只有24个氨基酸的差异,其中有15个位于前130个氨基酸中,第116位氨基酸可能与毒株的致病性有关.对两毒株S1蛋白的二级结构进行了预测和比较,结果发现,一个或极少数氨基酸的差异即可导致S1蛋白二级结构和抗原性的改变.
关键词： 传染性支气管炎病毒(IBV) S1基因 扩增 克隆 序列分析
