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HIV-1毒株gag和pol基因区抗原表位及耐药性突变分析
通过研究HIV-1 gag和pol基因序列变异特征,以了解抗原表位变异特点和耐药性突变情况.采集HIV-1阳性全血样本,使用巢式PCR扩增gag和pol基因部分区段,得到23份样本的PCR序列和相应样本的克隆序列gag基因为449份、pol基因为402份,基因分型为HIV-1 B和B'亚型.两种亚型的共享序列在选取的8个CTL抗原表位中,共有4个抗原表位发生了8个突变位点；另外位于p24区的5个抗原表位在PCR序列中没有发生变化,但在它们的克隆序列(9.80％)中发生了少数突变.在pol基因PCR序列和克隆序列中发现蛋白酶抑制剂(Protease inhibitors,PIs)和逆转录酶抑制剂(Reverse transcriptase inhibitors,RTIs)耐药性突变位点分别为18个和24个,其中只在克隆序列中发现的PIs和RTIs耐药性突变位点分别占其总数的94.44％(17/18)和62.50％(15/24).结果显示本研究样本PCR序列中表现出耐药性的比例较高(17.39％),并在克隆序列中存在少数免疫逃逸和耐药性突变,提示部分样本对现行抗病毒药物产生一定程度的耐药.
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1例早期HIV感染者体内病毒准种的各基因片段分析
目的 比较1例早期艾滋病病毒(HIV)感染者体内病毒不同基因片段准种复杂度.方法 使用套式聚合酶链反应(Nested-PCR),扩增HIV感染者外周血淋巴细胞中病毒的gag、pol、vif-vpr和env区的部分基因,通过克隆、测序方法观察该感染者体内病毒准种分布情况,比较不同基因片段检测病毒准种的可靠性.结果 不同基因片段检测病毒准种结果显示,该早期感染者体内的病毒不同基因片段显示的准种基因离散率不同,其中gag区显示出的病毒准种复杂度高,反映为该区段病毒准种的基因离散率高,为0.008;其他各区基因(pol、vif-vpr、env)的离散率依次为0.006、0.001、0.000.结论 该HIV感染者体内病毒准种的基因中,gag区基因的突变率较高,提示Gag在机体感染HIV早期承受的免疫压力较高,因此在病毒准种研究中,gag区应该作为重要的基因区域.
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中国HIV-1 B/C重组毒株慢性期感染者Pol特异性T淋巴细胞反应的研究
目的:研究中国主要流行的HIV-1 B/C重组毒株慢性期感染者Pol特异性T淋巴细胞反应特征并确定主要识别的免疫优势区域.方法:本研究以25名 HIV-1 B/C重组毒株慢性期感染者为研究对象,应用酶联免疫斑点试验(Elispot)测定技术综合测定了针对覆盖HIV-1 Pol基因的249条重叠多肽产生γ干扰素的特异性T淋巴细胞免疫反应.结果:25名 HIV-1 B/C重组毒株慢性期感染者中有15(60%)名检测到反应,主要识别位于逆转录酶区、氨基酸位置为Pol 241至295内的Pol5521、Pol5525、Pol5526、Pol5531四条多肽和Pol 708至722内的Pol5638多肽.慢性期感染者分泌γ干扰素的特异性T淋巴细胞反应强度与病毒载量呈现明显正相关(P=0.00695,r=0.660).结论:中国HIV-1 B/C重组毒株慢性期感染者主要识别逆转录酶区氨基酸位置为Pol 241至295和Pol 708至722的区域.
关键词： 人类免疫缺陷病毒 pol 特异性T淋巴细胞反应 酶联免疫斑点试验 γ干扰素 -
绵阳市MSM人群艾滋病预防服务及规范性病诊疗促进效果
目的 探索针对男男性行为者(MSM)人群特征的有效艾滋病预防服务及规范性病诊疗促进方法.方法 建立疾病预防控制中心(CDC)主导与MSM志愿者骨干实施相结合的MSM人群艾滋病性病防治组织模式,以核心同伴宣传(POL)干预方法为主,结合网络宣传、外展服务等进行MSM人群艾滋病、性病预防性服务和规范性病诊疗活动.2006年12月、2007年7月、2008年1月分别采用应答者驱动招募法(RDS)对MSM人群进行基线、中期及期终评估招募调查,对调查结果进行比较分析.结果 基线调查201人,中期200人,期终203人.基线、中期、期终调查比较,过去6个月接受过安全套免费发放的分别为54.7%、69.5%、6 9.0%,接受艾滋病检测服务的为12.9%、36.0%、54.2%,艾滋病健康咨询服务为21.9%、38.0%、45.1%,接受过同性朋友预防艾滋病宣传的为28.9%、56.0%、45.3%,差异均有统计学意义,上升趋势显著(P＜0.05);患性病期间,发生性行为使用安全套的分别为58.6%、76.7%、79.6%,差异有统计学意义(χ2=7.041,P=0.030),变化趋势显著(χ2=5.935,P=0.015);性伴通知、就诊方式差异无统计学意义.结论 CDC主导与MSM志愿者骨干实施相结合的以POL干预为主,结合外展、网络宣传等,有效提高了MSM人群艾滋病预防性服务覆盖面和性病期间安全套使用率,是适合MSM人群特点的一种有效预防服务和行为干预手段,但在如何针对MSM人群特点,更有效地促进性伴通知、检查治疗,提高规范就医比例上应继续进行探索.
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MSM人群艾滋病性病防治行为干预效果评价
目的 探索针对男男性行为者(MSM)人群特征的有效行为干预方法.方法 建立疾病预防控制中心(CDC)主导与MSM志愿者骨干实施相结合的MSM人群艾滋病性病防治组织模式,以核心同伴宣传(POL)干预方法为主,结合网络宣传、外展服务等进行MSM行为干预,2006年12月、2007年7月、2008年1月分别采用应答者驱动招募法(RDS)对MSM人群进行基线、中期及期终评估招募调查,对调查结果进行比较分析.结果 基线调查201人,中期200人,期终203人.基线、中期、期终调查比较:不同性伴性行为安全套坚持使用率分别为:近6个月31.4%、43.4%、51%,近3次38.1%、58.2%、64.2%,近1次56.8%、72.8%、82.1%,差异均有统计学意义,上升趋势显著(P<0.05);近6个月不同类别性伴数,差异均无统计学意义(P>0.05);固定性伴(BF)性行为方式分别为58.7%、71%、63.1%,差异有统计学意义(X2=6.782,P<0.05). 结论 CDC为主导、MSM志愿者骨干实施的组织模式下,通过为期1年的POL为主,结合网络、外展等干预,有效提高了MSM社群安全性行为意识.
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钦州市钦南区HIV-1流行亚型及基因变异特征研究
目的 调查流行于钦南区的HIV-1亚型种类并分析其基因变异特征.方法 抽取100例未抗病毒治疗的HIV-1感染者,从血样中提取病毒RNA或前病毒DNA,采用聚合酶链反应(PCR)扩增HIV-1 gag基因和pol基因片段并测序,用系统进化树分析其亚型,并计算gag和pol区的基因离散率.结果 97份血样获得gag基因序列或pol基因序列,4份血样的gag与pol分型不一致,其他93份分型明确,其中CRF01_AE重组型、CRF07_BC重组型、CRF08 BC重组型及G亚型分别占76.34％(71/93)、9.68％(9/93)、12.90％(12/93)和1.07％(1/93).CRF08_BC的gag基因离散率为0.059±0.005,高于CRF07_BC的0.053±0.005(P＜0.01)和CRF01_AE的0.049±0.004(P＜0.01).CRF01_AE的pol基因离散率为0.044±0.003,高于CRF07_BC的0.035±0.004(P＜0.01)和CRF08 BC的0.033±0.003(P＜0.01).结论 钦南区HIV-1存在至少3种流行亚型,其中CRF01_AE是主要的亚型,不同基因区的变异程度有所不同.
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绵阳市男男性行为人群艾滋病性病健康教育及行为干预效果研究
目的 探索针对男男性行为者(MSM)人群特征的有效干预方法.方法 2007-01/06在绵阳城区采用以核心同伴教育宣传员(POL)干预方法为主,结合网络宣传进行MSM宣传教育和行为干预,2006-12、2007-07采用应答者驱动招募法(RDS)对MSM人群进行基线和终期评估招募调查,对调查结果进行比较分析.结果 基线凋查201人,终期评估调查200人,人口学特征一至性检验差异均无统计学意义.基线与终期评估凋查比较:艾滋病性病基本知识总知晓率分别为68.6%、76.6%,不同情况下安全套使用的主观态度分别为有信心49.1%、62.3%,没有信心20.3%、14.8%,不确定30.7%、22.9%;不同性伴性行为安全套坚持使用率分别为近6个月31.4%、43.4%,近3次38.1%、38.1%,近1次56.2%、72.8%;艾滋病咨询、检测分别为12.9%、36.0%,差异均有统计学意义;近6个月不同类别性伴数,除男男肛交,差异均无统计学意义;近6个月患性病后通知所有性伴进行检查或接受治疗、自认艾滋病感染风险差异无统计学意义.结论 以POL为主,结合网络宣传的干预方法,在场所不发达的二级城市能在较短时间有效提高目标人群的艾滋病性病知识知晓率和安全套使用率,是适合MSM人群特点的一种有效干预手段.
