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基于UPLC-MS/MS分析胃溃疡模型大鼠口服加味小柴胡颗粒后血浆中8种有效成分的药代动力学
该文建立高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)测定胃溃疡模型大鼠血浆中8个有效成分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、甘草苷、甘草酸、盐酸小檗碱、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d)含量的方法,用于加味小柴胡颗粒的药代动力学研究.采用Zorbax SB-C18色谱柱(2.1 mm×100mm,1.8 μm),流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL· min-,柱温40℃,ESI离子源,MRM检测模式.结果各成分的线性关系良好(r＞0.996);日间和日内精密度RSD均＜15％;各成分的提取回收率在81.92％ ～ 104.8％.8种成分的达峰时间(tmax)依次为(2.69±2.02),(5.17±2.04),(0.25±0),(0.83±0.26),(0.92±0.20),(0.92±0.20),(0.58±0.20),(0.083±0)h,半衰期(t1/2)依次为(7.85±0.34),(10.16±2.21),(6.79±0.21),(8.32±0.48),(11.05±1.78),(11.56±3.46),(15.30±1.84),(5.54±1.91)h,药峰浓度(Cmax)依次为(55.02±1.67),(213.66±4.62),(62.61±0.69),(68.43±1.42),(62.22±0.39),(30.17±1.89),(61.79±4.81),(38.02±1.75)μg·L-1.该方法简便、准确、重复性好、专属性强,为加味小柴胡颗粒治疗胃溃疡的临床用药提供了实验依据.
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加味小柴胡颗粒对小鼠免疫性血小板减少性紫癜下丘脑-垂体-肾上腺系统的影响
目的 观察小鼠免疫性血小板减少性紫癜模型在肾上腺皮质激素干预前后肾上腺指数、血浆促肾上腺素(ACTH)、皮质酮(CORT)的变化以及加味小柴胡颗粒的调控作用.方法 建立小鼠免疫性血小板减少性紫癜模型,将之分为5组:正常组、模型组、加味小柴胡颗粒组、激素组和加味小柴胡颗粒+激素组.除正常组外,其余各组均造模,于造模后第7天开始分组给药,给药体积为30mL/kg,每日给药1次,共14 d.造模21 d后上述小鼠分别眼球取血,采用放射免疫法测促肾上腺素(ACTH)、皮质酮(CORT),处死后取肾上腺称重.结果 小鼠免疫性血小板减少性紫癜模型肾上腺指数、ACTH、CORT降低,与正常组比较有显著差异(P<0.05);加味小柴胡颗粒组肾上腺指数、ACTH、CORT升高,与模型组比较有显著差异(P<0.05).激素组肾上腺指数、ACTH、CORT下降更明显,与模型组相比有显著差异(P<0.05);加味小柴胡颗粒+激素组各项指标均上调,与激素组比较有显著差异(P<0.05).结论 小鼠免疫性血小板减少性紫癜模型存在下丘脑一垂体一肾上腺系统功能的低下,表现为肾上腺指数、ACTH、CORT降低,经激素干预后则功能受抑更明显,而加味小柴胡颗粒具有上调作用,能保护下丘脑一垂体一肾上腺系统功能.
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加味小柴胡颗粒质量标准的建立
目的:建立加味小柴胡颗粒的质量标准.方法:采用TLC法对制剂中柴胡、黄芩、黄连进行定性鉴别;采用UPLC法对制剂中甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、甘草酸单铵盐进行定量分析.色谱柱:Aglient ZORBAX Eclipse Plus C18(50 mm×2.1 mm,1.8 μm),流动相:乙腈(A)-0.1％磷酸水(B),流速:0.4μml·min-1,检测波长:[0 ～ 11 min:270 nm;11～ 12 min:254 nm],柱温:35℃,进样量:2μl.结果:柴胡、黄芩、黄连的TLC图谱斑点清晰,分离度好;甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、甘草酸单铵盐质量浓度分别在1.764 ～28.224μg·ml-1(r =0.999 9)、12.390 ～ 198.240μg·ml-1(r=0.999 7)、2.496 ～39.936 μg.ml-1(r=0.999 9)、4.200～67.200 μg· ml-1(r =0.999 5)、0.940～15.040μg·ml-1(r=0.999 9)、1.872 ～29.950 μg ·ml-1(r =0.999 6)浓度范围内线性关系良好;平均回收率分别为103.26％,101.36％,97.66％,103.27％,101.37％,102.44％,RSD分别为0.71％,0.81％,2.53％,1.58％,2.31％,3.34％(n=6).结论:所建质量标准能有效控制加味小柴胡颗粒的质量.
