首页 > 文献资料
-
白头翁汤正丁醇提取物对碱性pH条件下白念珠菌VVC临床株形态转化的影响
目的:探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng decoction,BAEB)在碱性条件下对白念珠菌VVC(vulvovaginal candidiasis)临床分离株酵母-菌丝形态转化的影响.方法:采用肉汤稀释法测定白头翁汤不同溶剂萃取物对VVC临床株的低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);倒置显微镜观察不同pH环境下VVC临床株形态;采用XTT还原法评价在pH 8.0时菌丝活性;扫描电镜观察白念珠菌菌丝形态;荧光显微镜观察菌体代谢活力;固体培养基上观测菌落形态;半固体培养基上观察菌丝侵袭能力;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测菌丝特异性基因ALS3,CSH1,SUN41,HWP1和CaPDE2的表达量.结果:白头翁汤正丁醇提取物(BAEB)对VVC临床株的MIC为64～128 mg· L-1,低于总提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和水提取物的MIC;pH 8.0时VVC临床株的菌丝形成能力强;扫描电镜结果显示512,1 024 mg·L-1的BAEB明显抑制VVC临床株的形态转化,荧光显微镜结果显示1 024 mg·L-1的BAEB可以降低VVC临床株的代谢活性;512,1 024 mg·L-1BAEB浓度的固体菌落未出现褶皱,1 024 mg·L-1BAEB浓度的半固体培养基内部未见菌丝侵袭;qRT-PCR检测显示1 024 mg·L-1时,ALS3,CSH1,SUN41,HWP1分别下调4.26,3.2,2.74,5.12倍,CaPDE2上调2.38倍.结论:BAEB在碱性pH条件下对白念珠菌VVC临床株的形态转化具有抑制作用.
-
白头翁汤正丁醇提取物对热带念珠菌毒力因子的影响
目的:探讨白头翁汤正丁醇提取物butyl alcohol extract of Baitouweng decoction,BAEB对热带念珠菌(Candida tropicalis)毒力因子细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成的影响.方法:采用微量稀释法测定BAEB对热带念珠菌的低抑菌浓度(MIC);XTT还原法测定BAEB对热带念珠菌生物膜抑制作用(SMIC80),Time-Kill法检测BAEB对热带念珠菌活菌数的动态影响;水-烃两相法测定BAEB对热带念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH)的影响;荧光显微镜观察BAEB对热带念珠菌菌丝形态的影响;扫描电镜观察BAEB对热带念珠菌生物膜形态的影响;激光共聚焦显微镜检测BAEB对热带念珠菌生物膜荧光信号强度的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测菌丝及生物膜相关基因UME6,NRG1,ALST3的表达量变化.结果:BAEB对9株热带念珠菌的MIC在64～128 mg· L-1,对热带念珠菌生物膜的SMIC80为256～512 mg·L-1,FLZ对热带念珠菌的MIC在1～1 024 mg·L-1,SMIC80为1024mg· L-1或以上,Time-Kill曲线显示256,512 mg·L-1BAEB具有明显的杀菌作用,CSH实验显示128,256,512 mg·L-1BAEB均能够降低其表面疏水性,SEM观察到512 mg·L-1 BAEB能够有效抑制热带念珠菌在硅胶导尿管上生物膜完整度,CLSM显示256,512 mg· L-1BAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度,qRT-PCR检测显示在256,512 mg·L-1BAEB作用下,ALST3,UME6基因表达量显著下调,NRG1无明显变化.结论:BAEB可以抑制热带念珠菌细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成等毒力因子.
关键词： 白头翁汤正丁醇提取物(BAEB) 热带念珠菌 菌丝 细胞表面疏水性 生物膜
