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栓钱菌质多糖的制备、纯化及性质研究
目的:制备、纯化栓钱菌质中的多糖成分,研究其单糖组成及性质。方法通过红栓菌固体发酵马钱子药材,培养30 d后,将发酵产物栓钱菌质烘干,粉碎,经水煮、浓缩、脱色、脱蛋白、醇沉处理后得到粗多糖,苯酚-硫酸法测定其多糖含量。采用透析、Sephadex G-150凝胶柱色谱法进一步纯化,酸水解后薄层色谱分析其单糖组成。结果栓钱菌质粗多糖含量为47.68%,得率为10.52%,经纯化后的多糖不含核酸和蛋白质,由葡萄糖和半乳糖2种单糖组成。结论栓钱菌质多糖是由葡萄糖和半乳糖组成的灰白色粉末状杂多糖。
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红栓菌胞外多糖抗肿瘤及免疫药理作用
目的:考察红栓菌胞外多糖PPS2的抗肿瘤及免疫药理作用.方法:检查了PPS2对实验小鼠体内肉瘤S-180的抑制效果和对脾淋巴细胞的转化率,测定了NK细胞活性、IL-2水平以及EAC瘤株小鼠肿瘤坏死因子的含量.结果:红栓菌胞外多糖可对S-180的抑制率达到52.6%~72.4%,对静止脾淋巴细胞有一定的促进增殖作用,剂量为100μg·mL-1时刺激指数达到1.83,同时,PPS2还能够增加NK细胞活性、明显提高IL-2水平.结论:PPS2具有较理想的抗肿瘤作用,其抑瘤机制可能与免疫调节作用有关.
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红栓菌多糖的免疫增强效应研究
为了探索红栓菌多糖的免疫增强作用,实验从深层发酵培养的红栓菌菌丝体中提取多糖PCP,通过动物实验证实PCP能明显增加小鼠免疫器官胸腺和脾脏的重量,提高巨噬细胞Mψ的吞噬活力,促进T细胞体外增殖及接触性皮炎反应,提高小鼠血清凝集素滴度,以上作用在ip剂量50,150,250mg/kg体重范围内呈现出明显的量效关系.
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红栓菌深层培养的研究
为了获得红栓菌胞外多糖,研究了红栓菌深层培养条件.用优化的发酵培养基,深层培养红栓菌,经28℃,160r/min的摇瓶培养,84h后,红栓菌胞外多糖的产量可达1.52g/L.在气升式发酵罐中进行培养,红栓菌菌丝球的生已长遵循Logistic模型,即Xt=(0.172e2.953t)/[1-0.328(1-e2.953t)],当通气量为0.8vvm时,培养84h后,胞外多糖产量可以达到1.65g/L.
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红栓菌粗多糖抗肿瘤及对荷瘤小鼠免疫功能影响的研究
目的研究红栓菌粗多糖的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法体外培养S180肉瘤细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型.将小鼠随机分组:①蒸馏水组;②红栓菌粗多糖高、中、低剂量组.观察计算抑瘤率、腹腔巨噬细胞吞噬指数及吞噬率、外周血淋巴细胞转化率、血清溶血素水平、以及血清中细胞因子TNF-α、IL-4含量.结果红栓菌粗多糖高、中、低剂量组对小鼠S180肉瘤均有抑制作用,能明显提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬指数与吞噬率、外周血淋巴细胞转化率及血清溶血素水平,并能提高血清中细胞因子TNF-α含量,对血清中细胞因子IL-4含量的影响作用不显著.结论红栓菌粗多糖具有抗肿瘤以及增强荷瘤小鼠免疫功能的作用.