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活血、益气方药对心梗后左心衰大鼠血TNF和血小板聚集影响的对比研究
目的:对比观察活血、益气方药对心肌梗死后左心衰大鼠血肿瘤坏死因子(TNF)和血小板聚集的影响.方法:采用大鼠心梗后左心衰动物模型,比较观察由丹参、川芎、红花组成的活血注射液和由党参、黄芪组成的益气注射液对心梗后左心衰大鼠血TNF、血小板聚集等指标的影响.结果:模型组较假手术组血TNF水平明显升高(2.842±0.98 3;1.412±0.387,P＜0.01),各治疗组均较模型组明显下降(P＜0.05);模型组与假手术组比较,血小板聚集率显著升高(67.06±3.95;46.33±3.56,P＜0.05),各治疗组治疗后血小板聚集率较模型组降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:活血、益气方药通过减少TNF的分泌或拮抗TNF的途径而降低血浆TNF水平,这可能是益气、活血方药改善心衰血流动力学、干预心室重构、抑制心肌细胞凋亡的生化机制之一.
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活血注射液对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化的影响
目的:观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响,并探讨核转录因子kappa B(NF-kB)在其中的调控作用.方法:HUVEC与单核细胞的黏附率用蛋白定量法检测;ICAM-1,VCAM-1mRNA和蛋白表达分别用RT-PCR技术和流式细胞仪检测;NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值用免疫细胞化学法测定.结果;ox-LDL作用HUVEC后12,24 h时,人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高,HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高,HUVEC的NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高,明显高于正常组(P<0.05,P<0.01),而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率和HUVEC ICAM-1,VCAM-1 mRNA和蛋白表达水平,以及显著降低HUVEC中NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值,与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),这种作用随着剂量的增加而增强.结论:活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1,VCAM-1 mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-kB p65的活性,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用.
关键词： 血管内皮细胞 单核细胞 细胞黏附分子 核转录因子kappa B 活血注射液 -
活血注射液对人单核-血管内皮细胞黏附及黏附分子表达的影响
目的 观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL )诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 的细胞间黏附分子-1(ICAM-1) 和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及对人单核细胞黏附作用的影响.方法 以培养HUVEC作为靶细胞, 在内皮细胞培养基中加入ox-LDL 制备细胞损伤模型.以活血注射液(由丹参、川芎、红花、赤芍组成)进行干预.蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的黏附率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 检测HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达;用流式细胞仪测定HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达.结果 ox-LDL作用HUVEC 12、24 h时,人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也明显升高, 均高于空白对照组(P<0.05,P<0.01);活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率及ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白的表达水平,与ox-LDL组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),该作用随剂量的增加而增强.结论 活血注射液能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达,抑制单核-血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,有利于减少或抑制动脉粥样硬化的形成.
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活血注射液对ox-LDL诱导的单核-内皮细胞黏附作用的影响
目的 观察活血注射液对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响.方法 以培养HUVEC作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入ox-LDL制备细胞损伤模型.采用蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的黏附率;RT-PCR 检测 HUVEC中ICAM-1的mRNA表达;用流式细胞仪测定HUVEC中ICAM-1的蛋白表达.结果 ox-LDL作用HUVEC后12、24 h时,人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高,HUVEC中ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高,均明显高于正常对照组(P＜0.01),而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率,以及显著降低ICAM-1的mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05,P＜0.01),这种作用随着剂量的增加而增强.结论 活血注射液能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,有利于减少或抑制动脉粥样硬化的形成.
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神农益气活血注射液对多脏器损伤兔的保护作用
为深入了解多器官功能不全综合征(MODS)发生发展病理机制,以便能对尚未发展成MODS的阶段进行有效防治,我们用阿霉素间羟胺法建立多脏器损伤动物模型,并以祖国医学"扶正活血,益气化瘀"法进行防治.报告如下.
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活血益气注射液对心衰大鼠心脏血流动力学影响的比较研究
目的:对比观察活血、益气注射液对心衰大鼠心脏血流动力学的影响.方法:采用结扎大鼠左冠状动脉主干造成心梗后心衰,将动物随机分为模型组、假手术组、活血组、益气组、西药组,治疗一个月后采用无创性心阻抗血流图测定各组大鼠治疗前后SV、CO、CI、LVET等参数.结果:各治疗组与治疗前相比在改善心脏血流动力学指标方面,经统计学处理均有显著效果(P＜0.05～0.01);治疗后与模型组相比有显著性差异(P＜0.05～0.01);各治疗组之间治疗后相比无统计学意义(P＞0.05).结论:无正性肌力作用的活血药长期应用于心衰(1个月)可取得与益气组同样的改善心衰血流动力学的作用.指出,研究证实其机制可能与其扩张冠肺、改善心肌供氧、降低心肌耗氧量、保护心肌细胞、抑制血小板聚集、清除氧自由基等作用有关.
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人脐静脉内皮细胞黏附分子1表达与活血中药对单核-血管内皮细胞黏附性能的干预
目的:观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白损伤人脐静脉内皮细胞后血管细胞黏附分子1的表达及与人单核细胞黏附的影响,探讨中药复方制剂防治动脉粥样硬化的作用机制.方法:实验于2004-03/12在北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室完成.①实验材料:活血注射液由丹参、川芎、红花、赤芍组成,比例为丹参2,其余药物为1,含生药2000 g/L.新生儿脐带(由中日友好医院妇产科提供,产妇及其家属知情同意,实验符合赫尔辛基宣言中的伦理学标准).②实验过程:以培养人脐静脉内皮细胞作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入氧化型低密度脂蛋白制备细胞损伤模型.③实验评估:采用蛋白定量法检测人脐静脉内皮细胞与单核细胞的黏附率[将人脐静脉内皮细胞,用M199培养液(对照组)和含不同浓度(10,20,40 ml/L)的活血注射液、氧化型低密度脂蛋白等实验因子的培养液(实验组)温育12,24 h.再加含单核细胞的M199培养液];反转录聚合酶链反应检测人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的mRNA表达;用流式细胞仪测定人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达[(将人脐静脉内皮细胞,分为对照组、氧化型低密度脂蛋白组与氧化型低密度脂蛋白+活血注射液(终浓度分别为10,20,40 ml/L)组,分别作用12,24 h).结果:①人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率在氧化型低密度脂蛋白作用12,24 h后升高,均明显高于对照组(P＜0.01),不同剂量活血注射液可明显抑制人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率,与氧化型低密度脂蛋白组相比差异均有显着性(P＜0.01),这种作用随着剂量的增加而增强.②氧化型低密度脂蛋白能明显上调人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的mRNA和蛋白表达水平.而不同剂量活血注射液能显著下调血管细胞黏附分子1的mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05,P〈0.01),与氧化型低密度脂蛋白组相比差异均有显着性(P＜0.05,P＜0.01),这种作用随着剂量的增加而增强.结论:氧化型低密度脂蛋白促进内皮细胞的血管细胞黏附分子1表达,活血注射液能通过下调血管细胞黏附分子1的表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,保护人内皮细胞免受氧化型低密度脂蛋白所致毒性损伤,从而减少或抑制动脉粥样硬化的形成.
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活血、益气方药对心衰大鼠血小板聚集影响的对比研究
本实验对比观察了活血注射液和益气注射液对心梗后左心衰动物血小板聚集率的影响，结果提示：二者对血小板聚集率均有明显改善，与模型组比较有显著性差异，与西药组相比无显著差异。益气注射液组对血小板聚集率的改善与活血注射液组无差异，说明单纯益气亦可起到活血的作用。
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活血、益气法及其方药治疗心衰大鼠心气虚证的实验研究
目的:对比观察活血、益气法及其方药对心衰大鼠心气虚证证候、血流动力学及心肌细胞凋亡和相关基因表达、左室重构的影响,为心衰治疗的临床用药提供依据..方法:在心梗后心衰大鼠心气虚证病证结合模型上,观察活血、益气注射液对心气虚证证候、血流动力学及心肌细胞凋亡和相关基因表达、左室重构的影响,同时设西药组、空白组作为对照.结果:活血注射液在以下方面与益气法治疗心衰心气虚证具有同效:①改善心衰大鼠血流动力学参数(SV、CO、CI、LVET);②改善心衰大鼠心气虚病证结合模型的心气虚指标(心率、呼吸频率、力竭性游泳时间、心功能参数等).对以下指标的改善某些方面好于益气法:①可减少心衰大鼠心肌细胞凋亡,活血组明显少于益气组(P＜0.05);下调心肌局部Bax蛋白表达,上调心肌局部Bcl-2蛋白表达;②对心衰大鼠左室重构有一定的干预作用,具体表现为健存区肥大的心肌细胞较模型组少,心肌细胞外胶原成分较模型组减少,降低心脏与体重比值,增大左室变薄比,减小左心腔面积,单位面积内心肌细胞核数较模型组为多.结论:心衰心气虚证不仅有其功能的失常,而且还有与心主血脉功能相关的组织结构的改变.无正性肌力作用的活血药可能通过改善心衰心气虚证的相关组织结构的物质基础终实现心衰心气虚证的好转,在针对心衰心气虚证的治疗中除用益气法外,活血法的应用,有阻止和逆转心衰心气虚发展的作用,从早期阻止和逆转心衰病理进程的观点认识,活血法具有积极的临床意义.
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活血注射液对心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达影响的实验研究
目的:探讨以丹参为主组成的活血注射液对心梗后心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、 Bcl-2蛋白表达影响.方法:(1)药物:活血注射液由丹参、川芎等组成,比例为丹参2,川芎等为1; 由北京中医药大学东直门医院制剂室按注射剂工艺制成注射液,每毫升相当于生药2 g.卡托普利购于常州制药厂,卡托普利原料药溶于无菌蒸馏水中,每毫升含卡托普利3 mg.
