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巢式聚合酶链反应检测人类DNA修复基因:ERCC2/XPDexon 6突变
背景与目的: 探讨血样DNA来源困难及DNA产量低的情况下,获得理想的可供突变分析的PCR产物的方法.材料与方法:应用巢式聚合酶链反应(NPCR)-限制性片断长度多态(RFLP)技术检测了人类微量DNA样品的DNA修复基因: ERCC2/XPD exon 6的单核甘酸多态(SNP). 结果: 该位点群体基因分型结果显示:自身平衡检验结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡法则. 结论: 巢式PCR技术在扩增微量DNA、分析突变的实验中较一般单次扩增PCR技术更具有敏感性高,特异性强的优点.
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不同人群隐匿性乙型肝炎病毒感染检测分析
目的:探讨不同人群隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染情况及ELISA检测血清HBsAg阴性的原因.方法:采用巢式聚合酶链反应(PCR)检测150例健康献血员、263例健康体检自然人群和21例不明原因肝炎患者血清HBVDNA.用电化学发光免疫技术对检测出的隐匿性HBV感染者血清HBsAG进行定量测定.结果:隐匿性乙型肝炎病毒感染率分别为1.3%、4.2%和38.1%.电化学发光免疫技术检测隐匿性HBV感染者血清HBsAg,未检出有5例,在0.05ng/ml-0.1ng/ml有7例,0.1ng/ml～0.5ng/ml有6例,0.5ng/ml～10ng/ml有2例.结论:隐匿性HBV感染在不同人群中广泛存在.血清HBsAg阴性的机制主要是HBV复制和基因表达的严重抑制,以及HBV基因突变.
关键词： 隐匿性乙型肝炎病毒感染 巢式聚合酶链反应 电化学发光免疫 -
白血病患者血清人细小病毒B19-DNA的检测及临床意义
目的:了解免疫功能低下的白血病患者人细小病毒B19-DNA的感染状况,探讨B19-DNA感染后对白血病的影响及危害程度.方法:用设计合成的两对引物和巢式聚合酶链反应(PCR)技术对80例白血病患者血标本进行了B19-DNA检测.结果:①化疗期间白血病患者血清标本B19-DNA的阳性率32.5%,与对照组(2.94%)比较差异非常显著(P＜0.01);②B19-DNA阳性率急性与慢性白血病无显著差异(P＞0.05);③急性淋巴细胞白血病化疗期间有较高的B19感染率(36.9%);④儿童白血病与成人白血病无显著差异(P＞0.05).结论:白血病患者是B19-DNA的易感群体,化疗及免疫功能低下的白血病患者易引起持续感染而致慢性贫血.
